Question

【題目】土壤中的某些微生物能產(chǎn)生分解纖維素的纖維素酶，纖維素酶在食品行業(yè)和環(huán)境保護中都有十分廣泛的應用�；卮鹣铝袉栴}：

（1）篩選纖維素分解菌時，可從富含有機質(zhì)的土壤中取樣，然后將土壤濾液加入到以_________為唯一碳源的液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)。吸取適量的培養(yǎng)液，稀釋涂布到含有剛果紅的固體培養(yǎng)基上，等培養(yǎng)基上長出菌落后，通過_________就可以篩選出纖維素分解菌。

（2）從纖維素分解菌的液體培養(yǎng)基中獲得纖維素酶粗提取液，將粗提取液裝入透析袋中，置于pH適宜的磷酸緩沖液中進行透析處理，這樣就可以除去其中分子量_________（填“較大”或“較小”）的雜質(zhì)。采用凝膠色譜法分離純化纖維素酶時，凝膠柱中不能有氣泡存在，因為氣泡會_________，降低分離效果。

（3）將纖維素酶固定化可以使酶反復利用，一般來說，酶適合采用_________法固定化。研究人員測定了不同溫度對酶活性的影響，結果如圖所示。纖維素酶活性的高低，可以用單位時間內(nèi)、單位體積中_________來表示。圖示結果表明，相對于游離酶，固定化酶具有的優(yōu)點是__________。

Answer 1

【答案】纖維素 是否產(chǎn)生透明圈 較小 攪亂蛋白質(zhì)的洗脫次序 化學結合和物理吸附 纖維素的減少量(或葡萄糖的增加量) 最適溫度顯著提高

【解析】

1、纖維素分解菌可以用剛果紅染液進行鑒別，能夠產(chǎn)生透明圈的菌落就是纖維素分解菌。

2、酶反應速度可以用單位時間內(nèi)、單位體積中反應物的減少量或產(chǎn)物的增加量來表示。

（1）篩選纖維素分解菌時，從富含有機質(zhì)的土壤中取樣，土壤中含有的纖維素分解菌很少，將土壤濾液加入以纖維素為唯一碳源的液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，由于培養(yǎng)液中的碳源只有纖維素，能分解纖維素的微生物就可以快速繁殖，這樣就可以增加纖維素分解菌的濃度。吸取適量的培養(yǎng)液，稀釋涂布到含有剛果紅的固體培養(yǎng)基上，由于纖維素與剛果紅能形成紅色復合物，而纖維素被分解后的產(chǎn)物不能與剛果紅形成紅色復合物，所以等培養(yǎng)基上長出菌落后，通過是否產(chǎn)生透明圈就可以篩選出纖維素分解菌。

（2）從纖維素分解菌的液體培養(yǎng)基中獲得纖維素酶粗提取液，將粗提取液裝入透析袋中，由于透析袋能讓小分子物質(zhì)自由進出，而大分子物質(zhì)(如蛋白質(zhì))會保留在透析袋中，因此利用透析袋可除去粗提取液中的分子量較小的雜質(zhì)。采用凝膠色譜法分離純化纖維素酶時，凝膠柱中不能有氣泡存在，因為氣泡會攪亂蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。

（3）酶一般適合采用化學結合和物理吸附法固定化，因為酶分子體積很小，用包埋法酶分子容易從包埋材料中漏出。分析圖示結果可知，相對于游離酶，固定化酶具有的優(yōu)點是最適溫度顯著提高，酶的耐熱性更強，熱穩(wěn)定性提髙，這樣酶就能在更大的溫度范圍內(nèi)發(fā)揮催化作用。