【題目】大腸桿菌pUC18質粒是基因工程中常用的運載體。某限制酶在此質粒上的唯一酶切位點位于LacZ基因中,如果沒有插入外源基因,LacZ基因便可表達出β-半乳糖苷酶,當培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被β-半乳糖苷酶水解成藍色,大腸桿菌將形成藍色菌落。反之,則形成白色菌落。下圖表示利用此質粒實施基因工程的主要流程。請分析并回答:

(1)已獲得的目的基因可利用_____________技術進行擴增。

(2)目的基因插入質粒構建重組質粒的過程中,需要DNA連接酶恢復___________鍵。

(3)將試管Ⅰ中的物質和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是____________________;大腸桿菌需事先用Ca2+進行處理,目的是______________________________________。

(4)將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)基中除去含有大腸桿菌必需的營養(yǎng)物質和生長因子外,還應加入IPTG、X-gal以及氨芐青霉素,其中加入氨芐青霉素的作用是篩選出__________________。

(5)若觀察到培養(yǎng)基上出現(xiàn)______色菌落,則說明大腸桿菌中已成功導入了重組質粒。如果作為受體細胞的大腸桿菌也含有LacZ基因,則不利于重組質粒的篩選,原因是無論大腸桿菌是否導入重組質粒,菌落均會呈現(xiàn)_________。

【答案】 PCR 磷酸二酯鍵 進行轉化(將目的基因導入大腸桿菌) 使大腸桿菌細胞處于感受態(tài)(使大腸桿菌易于吸收環(huán)境中的DNA) 導入pUC18質粒的大腸桿菌 藍色

【解析】試題分析:分析題圖:大腸桿菌pUC18質粒含有氨芐青霉素抗性基因和LacZ基因,但限制酶的切割位點位于LacZ基因上,所以構建成的重組質粒含有氨芐青霉素抗性基因,但LacZ基因被破壞,不能產(chǎn)生β一半乳糖苷酶。試管Ⅰ中是基因表達載體,試管Ⅱ中是大腸桿菌,將試管I中的物質和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是進行轉化,最后用選擇培養(yǎng)基進行篩選。

(1)PCR技術能在短時間內大量擴增目的基因,所以已獲得的目的基因可利用PCR技術進行擴增。

(2)基因工程中,DNA連接酶作用后形成的是磷酸二脂鍵。

(3)將試管Ⅰ中的物質和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是使目的基因進人受體細胞內,并在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達,即進行轉化;大腸桿菌需事先用Ca2+進行處理,增大細胞壁的通透性,使之處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)。

(4)由于重組質粒含有氨芐青霉素抗性基因,且沒有被破壞,因此導入重組質粒的大腸桿菌能抗氨芐青霉素,所以培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素的作用是篩選出導入pUC18質粒的大腸桿菌。

(5)重組質粒上的LacZ基因被破壞,不能產(chǎn)生β一半乳糖苷酶,若大腸桿菌中已成功導入了重組質粒,則其在含有IPTG和X-gal的培養(yǎng)基中形成白色菌落.如果作為受體細胞的大腸桿菌也含有LacZ基因,則無論大腸桿菌是否導入重組質粒,均會呈現(xiàn)藍色菌落。

練習冊系列答案
相關習題

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖是某生物的細胞分裂簡圖,下列有關敘述正確的是 (  )

A. 該細胞中含有4條染色體、8個DNA分子B. 該細胞處于減數(shù)第二次分裂后期

C. 該細胞為次級卵母細胞或次級精母細胞D. 該細胞分裂后可產(chǎn)生兩個基因組成相同的精子

查看答案和解析>>

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】實施基因工程的最終目的是(

A. 定向改造生物的遺傳性狀B. DNA分子進行重組

C. 提取完整的DNA分子D. 將目的基因提取出來

查看答案和解析>>

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下列選項中,不屬于細胞膜功能的是( )

A. 控制物質進出細胞 B. 將細胞與外界環(huán)境分割開

C. 進行細胞間的信息交流 D. 控制細胞的代謝

查看答案和解析>>

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】孟德爾用純種黃圓豌豆和純種綠皺豌豆做雜交實驗,F(xiàn)2中出現(xiàn)的不同于親本的類型是

A.黃綠、圓皺 B.黃圓、圓皺 C.黃綠、綠圓 D.黃皺、綠圓

查看答案和解析>>

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】哥本哈根世界氣候大會所倡導的低碳生活獲得普遍認同。溫室效應是大氣中CO2過多,與碳循環(huán)失衡有關。圖示生態(tài)系統(tǒng)結構及碳循環(huán)模式圖,①、②、③、④、⑤代表生理過程。據(jù)圖回答下列問題 :

(1)碳在生物群落和無機環(huán)境之間主要是以____________的形式進行循環(huán),而在生物群落內部則主要是以_____________的形式進行流動。

(2)①代表的生理過程是 _________________

(3)寫出圖中含有的食物鏈(用字母表示)__________________

(4)生態(tài)系統(tǒng)中D和C的種間關系是 ____________,若A固定的能量不變,D的數(shù)量減少,則C可利用的能量___________。

(5)若生產(chǎn)者有10000kg,位于第三營養(yǎng)級的生物至少可獲得_____________kg。

查看答案和解析>>

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】人體的下列細胞中,一定存在Y染色體的是( )

A. 男性的紅細胞B. 次級精母細胞C. 初級精母細胞D. 精細胞

查看答案和解析>>

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如果DNA分子上某一片段是基因,則該片段( )

①攜帶遺傳信息 ②上面有密碼子 ③能轉錄產(chǎn)生mRNA ④能進入核糖體 ⑤能運載氨基酸 ⑥能控制蛋白質的合成

A. ①③⑤ B. ②④⑥ C. ①③⑥ D. ②④⑤

查看答案和解析>>

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】人類每條染色體上都有很多基因。下圖表示1號染色體上的幾種基因對性狀的控制及基因在染色體上的分布位置,若不考慮染色體交叉互換,據(jù)此不能得出的結論是

A他們的兒子可能出現(xiàn)橢圓形紅細胞概率為1/2

B母親正常減數(shù)分裂第一極體中的基因組成是aDe

C他們的孩子不可能是Rh陰性

D他們有的孩子可能不產(chǎn)生淀粉酶

查看答案和解析>>

同步練習冊答案