Question

（2003·上海）已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞，請回答：

（1）試管中除融合的雜種細(xì)胞外，還有________種融合細(xì)胞。

（2）設(shè)計一種方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞，并說明原理。

方法：________________________。

原理：________________________。

（3）將分離出的雜種細(xì)胞在不同條件下繼續(xù)培養(yǎng)獲得A、B、C三種細(xì)胞株。各細(xì)胞株內(nèi)是否含有人染色體的情況如下表（“＋”表示有，“－”表示無），測定各細(xì)胞株中人體所具有的五種酶的活性結(jié)果是：

①B株有a酶活性　②A、B、C株均有b酶活性　③A、B株有c酶活性�、蹸株有d酶活性�、軦、B、C株均無e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因影響，則支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的第________、________、________和________號染色體上。

Answer 1

答案：
解析：

解析：（1）將人淋巴細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞放在試管中混合，再加聚乙二醇促融后，試管中可能有5種細(xì)胞：人淋巴細(xì)胞；鼠骨髓瘤細(xì)胞；人淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞；鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞；雜交瘤細(xì)胞。故試管中融合的細(xì)胞，除雜種細(xì)胞（雜交瘤細(xì)胞）外，還有2種細(xì)胞。（2）分離雜種細(xì)胞的方法，應(yīng)根據(jù)鼠骨髓瘤細(xì)胞無S途徑僅有D途徑以及D途徑能被氨基嘌呤阻斷這方面考慮。若在培養(yǎng)基中加入氨基嘌呤，則鼠骨髓瘤細(xì)胞及鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞由于不能合成DNA而不能生存，人淋巴細(xì)胞及人淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞由于不能分裂增殖（由題干中知）也不能生存。故只有雜種細(xì)胞能生存，可分離出雜種細(xì)胞。（3）據(jù)表分析，A細(xì)胞株含有1、2、3、4號人染色體；B細(xì)胞株含有1、2、5、6號人染色體；C細(xì)胞株含有1、3、5、7號人染色體。據(jù)題干知：A、B、C三個細(xì)胞株均有b酶活性，說明支配b酶的基因位于1號人染色體上，因為A、B、C三個細(xì)胞株共有的人染色體只有1號。同理，c酶基因位于2號人染色體；c酶基因位于8號人染色體上，c酶基因位于7號人染色體上；b酶基因位于6號人染色體上。 答案：（1）2（2）向培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖細(xì)胞　加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞中可利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖（3）6　1　2　7　8