Question

【題目】回答下列（一）（二）小題

（一）請回答泡菜制作以及乳酸菌分離純化有關(guān)問題

（1）制作泡菜時(shí)，所用鹽水需煮沸，其目的是________。為了縮短制作時(shí)間，可在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入少量陳泡菜液的作用是________。從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時(shí)間內(nèi)，泡菜液逐漸變酸。這段時(shí)間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是________。

（2）某同學(xué)嘗試從新鮮的泡菜濾液中分離純化乳酸菌。首先需要用________對泡菜液進(jìn)行梯度稀釋，之后用________法接種到滅菌的培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)過程不需要的操作是________（A．倒置 B．恒溫 C．無氧 D．充入CO2）

（二）白菜、甘藍(lán)均為二倍體，體細(xì)胞染色體數(shù)目分別為 20、18�！鞍撞恕�甘藍(lán)”是用細(xì)胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種，它具有生長期短、耐熱性強(qiáng)和易于儲(chǔ)藏等優(yōu)點(diǎn)。下圖是“白菜—甘藍(lán)”的雜交過程示意圖，回答以下問題：

（1）為了得到原生質(zhì)體需在0．5—0．6mol/L的__________環(huán)境中用_______來處理白菜細(xì)胞和甘藍(lán)細(xì)胞。

（2）通常用________誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，融合完成的標(biāo)志是 ____________。在組織培養(yǎng)的過程中，植株幼苗的根、芽完全長成，將幼苗移至__________中，保持80%濕度，并逐漸降低濕度，直到與自然濕度接近后，移栽至土壤定植。

（3）通常情況下，白菜和甘藍(lán)有性雜交是不能成功的，原因是____，若對白菜和甘藍(lán)采用雜交育種 方法能成功的話，則得到的后代應(yīng)含的染色體數(shù)和通過圖示方法所獲得的植株的染色體數(shù)分別是_____。

（4）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和傳統(tǒng)雜交技術(shù)相比的優(yōu)點(diǎn)是 _____________。

Answer 1

【答案】殺滅微生物 增加乳酸菌數(shù)量（接種乳酸菌菌種） 乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少 無菌水 涂布分離 D 甘露醇 果膠酶 聚乙二醇（PEG） 新細(xì)胞壁形成 草炭土或蛭石 存在生殖隔離 19，38 克服遠(yuǎn)緣雜交不親和

【解析】

1、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗帷?/span>

2、泡菜的制作流程是：選擇原料、配置鹽水、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵。

3、泡菜中的亞硝酸鹽含量可以用比色法測定，即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽，重氮鹽與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

4、植物體細(xì)胞雜交的具體過程：

5、植物體細(xì)胞雜交的意義：克服元源雜交不親和的障礙

Ⅰ（1）制作泡菜時(shí)，所用鹽水要煮沸，其目的是消毒殺菌或滅菌除氧。陳泡菜液含有乳酸菌，可為泡菜發(fā)酵提供菌種，因此為了縮短制作時(shí)間，有人還會(huì)在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液；泡菜制作過程中，由于乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，泡菜液逐漸變酸，隨乳酸菌的數(shù)量增加，泡菜液的酸性增強(qiáng)，不耐酸的雜菌數(shù)量逐漸減少。

（2）分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用無菌水對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，之后用涂布分離法接種到滅菌的固定培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)過程需要將培養(yǎng)皿倒置放在無氧，恒溫的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，故需要ABC三項(xiàng)操作，不需要D沖入二氧化碳。

Ⅱ（1）植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，為了得到白菜和甘藍(lán)的原生質(zhì)體，根據(jù)酶的專一性原理，可在0.5-0.6mol/L的甘露醇環(huán)境中用纖維素酶和果膠酶來處理白菜細(xì)胞和甘藍(lán)細(xì)胞，從而去除細(xì)胞壁。

（2）通常用PEG（聚乙二醇）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；融合完成的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁。在組織培養(yǎng)的過程中，植株幼苗的根、芽完全長成，將幼苗移至草炭土或蛭石中，保持80%濕度，并逐漸降低濕度，直到與自然濕度接近后，移栽至土壤定植。

（3）如圖通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“白菜一甘藍(lán)”體細(xì)胞染色體數(shù)為20+18=38；通常情況下，由于白菜和甘藍(lán)之間存在生殖隔離，因此白菜和甘藍(lán)有性雜交是不能成功的；若對白菜和甘藍(lán)采用雜交育種方法能成功的話，得到的后代20/2+18/2=19條染色體。

（4）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和傳統(tǒng)雜交技術(shù)相比的優(yōu)點(diǎn)是克服元源雜交不親和的障礙，培育作物新品種。