Question

4．阿拉伯膠是一種多糖，能被土壤中某些能合成阿拉伯膠降解酶的微生物分解，回答下列問題．
（1）為從土壤中分離獲得能分解阿拉伯膠的單菌落，某同學設計了A、B、C、D四種培養(yǎng)基（成分見下表）：

培養(yǎng)基	阿拉伯膠	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	MgSO4•7H2O	KCl	FeSO4•7H2O	瓊脂
A	25g/L	-	-	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L	15g/L
B	25g/L	-	3g/L	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L	15g/L
C	25g/L	3g/L	-	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L	-
D	25g/L	3g/L	-	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L	15g/L

據(jù)表判斷，則應選用表中的D培養(yǎng)基，針對不選用的其他培養(yǎng)基，分別說明原因：
①A培養(yǎng)液缺少氮源；
②B培養(yǎng)液不是以阿拉伯膠為唯一碳源；
③C為液體培養(yǎng)基不能分離單菌落．
（2）為獲得單菌落，可將土壤稀釋液涂布接種在上述選定培養(yǎng)基上．在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導致菌體堆積，影響分離效果．在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項不需要的是③（填序號）．
①酒精燈　②培養(yǎng)皿�、埏@微鏡　④無菌水
（3）為了確定微生物產生的阿拉伯膠降解酶的最適溫度，某同學測得相同時間內，在35℃、40℃、45℃溫度下降解10g阿拉伯膠所需酶量依次為4mg、1mg、6mg，則上述三個溫度中，45℃條件下該酶活力最�。疄榱诉M一步確定該酶的最適溫度，應在35～45℃范圍內設計后續(xù)實驗．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學成分	根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學藥品	依據(jù)微生物產生的某種代謝產物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學藥品反應，產生明顯的特征變化而設計	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）要分離獲得能分解阿拉伯膠的單菌落，所選擇的培養(yǎng)基的特點是：固體培養(yǎng)基且以阿拉伯膠為唯一碳源．表中A培養(yǎng)液缺少氮源，B培養(yǎng)液不是以阿拉伯膠為唯一碳源，C為液體培養(yǎng)基不能分離單菌落，因此應該選擇D培養(yǎng)基．
（2）在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多，若滴加的菌懸液量過多，則培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導致菌體堆積，影響分離效果．在樣品稀釋和涂布平板步驟中，需要使用酒精燈對接種環(huán)進行滅菌，對培養(yǎng)皿進行滅菌，用無菌水稀釋菌液，但不需要用顯微鏡．
（3）相同時間內，在35℃、40℃、45℃溫度下降解10g阿拉伯膠所需酶量依次為4mg、1mg、6mg，則上述三個溫度中，40℃條件下該酶活力最大，45℃條件下該酶活力最�。疄榱诉M一步確定該酶的最適溫度，應在35～45℃范圍內設計后續(xù)實驗．
故答案為：
（1）A培養(yǎng)液缺少氮源       B培養(yǎng)液不是以阿拉伯膠為唯一碳源     C為液體培養(yǎng)基不能分離單菌落      D
（2）培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導致菌體堆積，影響分離效果       ③
（3）45℃35～45℃

點評 本題結合表格數(shù)據(jù)，考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的基本成分、種類及功能；掌握接種微生物常用的兩種方法及稀釋涂布平板的相關操作，能結合表中和題中信息準確答題．