Question

【題目】【現(xiàn)代生物科技專題】拉克斯是由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)培育的世界首例轉(zhuǎn)基因低乳糖奶牛，誕生于2012年4月24日。它的誕生給世界患乳糖不耐癥的消費(fèi)群體帶來希望。

（1）導(dǎo)入拉克斯的乳糖酶基因需要與___________結(jié)合后，才能導(dǎo)入___________（細(xì)胞）中，—般導(dǎo)入方法為___________。

（2）之后在體外培養(yǎng)該細(xì)胞時(shí)，必須滿足無(wú)菌無(wú)毒、營(yíng)養(yǎng) 、___________、氣體環(huán)境等條件，才能使細(xì)胞大量增殖，培養(yǎng)環(huán)境中的無(wú)菌空氣必須加5%的CO2，目的是______________________。

（3）為驗(yàn)證外源基因整合到奶�；�因組后是否轉(zhuǎn)錄，可從轉(zhuǎn)基因奶牛的細(xì)狍中提取mRNA并反轉(zhuǎn)錄成_______，由于反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物含量少，故需要利用特異性引物進(jìn)行基因的體外擴(kuò)增，該方法稱為______技術(shù)。

Answer 1

【答案】 載體 （奶牛）受精卵 顯微注射法 合適的溫度和pH 維持培養(yǎng)液的pH （c）DNA PCR（或聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）

【解析】試題分析：基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）拉克斯的乳糖酶基因是目的基因，需要先與運(yùn)載體結(jié)合，才能通過顯微注射法導(dǎo)入（奶牛）受精卵。

（2）導(dǎo)入目的基因的受精卵經(jīng)過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，進(jìn)行細(xì)胞增值，該過程需要滿足無(wú)菌無(wú)毒、營(yíng)養(yǎng)、合適的溫度和pH、氣體環(huán)境等條件，培養(yǎng)環(huán)境中的無(wú)菌空氣必須加5%的CO2的目是維持培養(yǎng)液的pH。

（3）mRNA反轉(zhuǎn)錄形成的是DNA，由于獲取的該DNA分子量較少，可以用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。