Question

【題目】已知某RNA病毒包膜表面的S蛋白負責(zé)病毒的吸附、融合和侵入宿主細胞，也是誘導(dǎo)宿主體液免疫反應(yīng)的抗原。針對該病毒的S蛋白研制疫苗和抗體的部分流程如下圖。回答下列問題：

（1）過程①提取該抗原的RNA并將RNA____形成DNA。要獲得大量的病毒基因可利用PCR技術(shù)擴增，其前提是要有一段已知S蛋白基因的脫氧核苷酸序列，以便____。

（2）過程③中，常利用改造后的腺病毒來充當(dāng)載體攜帶S蛋白基因，則改造后的腺病毒能作為載體需具備的條件有____（答出兩點即可），拼裝S蛋白基因重組載體所需的工具酶有____。

（3）提取的S蛋白可作為疫苗使用，選擇以病毒包膜的S蛋白作為疫苗比開發(fā)減毒病毒作為疫苗更安全，主要原因是____。

（4）通過過程⑦獲得的X稱為____，其產(chǎn)物的主要優(yōu)點有____（答出兩點即可）。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 合成引物 能自主復(fù)制、有多個限制酶切位點、有標(biāo)記基因、對宿主細胞無害 限制酶和DNA連接酶 蛋白質(zhì)不具侵染性，不會破壞細胞結(jié)構(gòu) 雜交瘤細胞 特異性強、靈敏度高、可大量制備

【解析】

分析題圖可知，圖示為利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)和動物細胞融合技術(shù)制備抗S蛋白單克隆抗體流程，利用病毒RNA經(jīng)過①過程逆轉(zhuǎn)錄得到病毒DNA，通過②PCR技術(shù)擴增獲得大量S蛋白基因，③過程為基因表達載體的構(gòu)建，④過程為將目的基因?qū)�入受體細胞，⑤過程為S蛋白作為抗原刺激小鼠B細胞，⑥過程為B細胞增殖分化生成漿細胞，⑦過程為利用誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)漿細胞與小鼠骨髓瘤細胞進行融合并篩選，獲得產(chǎn)生抗S蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞，再經(jīng)過⑧大規(guī)模培養(yǎng)得到抗S蛋白單克隆抗體。

（1）以RNA為模板合成DNA的過程稱為逆轉(zhuǎn)錄；利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物，引物在PCR擴增過程可引導(dǎo)子鏈的延伸。

（2）為攜帶外源DNA進入受體細胞并能穩(wěn)定存在和表達，作為載體需具備的條件有：能自主復(fù)制、有多個限制酶切位點、有標(biāo)記基因、對宿主細胞無害。構(gòu)建S蛋白基因重組載體的過程需要用相同的限制酶切割目的基因和載體，然后用DNA連接酶將二者連接起來。

（3）減毒的病毒可能會恢復(fù)活性，可能會對人體細胞造成一定的傷害，從而引起一系列并發(fā)癥，而S蛋白與減毒病毒相比，不具侵染性，不會破壞細胞結(jié)構(gòu)，因此用S蛋白作為疫苗更安全。

（4）由分析可知，⑦過程獲得的X為雜交瘤細胞，能產(chǎn)生抗S蛋白單克隆抗體，單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高、可大量制備的優(yōu)點。