回答下列關(guān)于基因工程的問題

下圖1是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線，表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖2、圖3中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。

1．若對圖2中質(zhì)粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性如何變化，為什么？________

2．圖中將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒，可以只用EcoR I同時酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因，也可以使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因，后一個方法的優(yōu)點在于可以防止________。

3．為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入________酶。重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了________。

4．圖1過程①可采用的操作方法是________，過程②可采用的生物技術(shù)是________。過程③可采用的生物技術(shù)是________。

5．分別從分子水平簡述雌性轉(zhuǎn)基因牛分泌人乳鐵蛋白的過程是________。

答案：
解析：

　　1．SmaⅠ識別的DNA序列只有G和C，而G和C之間可以形成三個氫鍵，A和T之間可以形成二個氫鍵，所以SmaⅠ酶切位點越多，熱穩(wěn)定性就越高（2分）

　　2．只使用EcoR I，則質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端相同，用連接酶連接時，會產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因自身連接物，而利用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ剪切時，質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端不同，用DNA連接酶連接時，不會產(chǎn)生自身連接產(chǎn)物。（2分）

　　3．DNA連接酶　篩選（每空1分）

　　4．顯微注射　細胞培養(yǎng)　胚胎移植技術(shù)（每空1分）

　　5．DNA轉(zhuǎn)錄成mRNA，mRNA翻譯成蛋白質(zhì)（2分）


練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

回答下列關(guān)于基因工程的問題

下圖1是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線，表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖2、圖3中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。

（1）若對圖2中質(zhì)粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性如何變化，為什么？                                                                     

（2）圖中將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒，可以只用EcoR I同時酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因，也可以使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因，后一個方法的優(yōu)點在于可以防止                                        。

（3）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入        酶。重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了          。

（4）圖1過程①可采用的操作方法是             ，過程②可采用的生物技術(shù)是      。過程③可采用的生物技術(shù)是                 。

（5）分別從分子水平簡述雌性轉(zhuǎn)基因牛分泌人乳鐵蛋白的過程是_______________。

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科目：高中生物 來源： 題型：閱讀理解

回答下列關(guān)于基因工程的問題：

如圖是將人的生長激素基因?qū)爰毦鶥細胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用載體為質(zhì)粒A。已知細菌B細胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細菌B后，其上的基因能得到表達，根據(jù)圖示所給信息回答下列問題：

(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒時，用同一種限制性內(nèi)切酶分別切割目的基因和質(zhì)粒，露出相同的黏性末端，將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的             ，使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。

(2)目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細菌細胞時，效率還不高；導(dǎo)入完成后得到的細菌，實際上有的根本沒有導(dǎo)入質(zhì)粒；有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A；只有少數(shù)導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細菌是否導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒：

將得到的細菌涂抹在一個含有                的培養(yǎng)基上，能夠生長的就是導(dǎo)入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的，反之則沒有。此過程中體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須具備的兩個條件                      ；                                            。

(3)若進一步鑒定證明細菌中導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A還是重組質(zhì)粒，將得到的細菌涂抹在一個含有

                的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，若細菌                ，則導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程，應(yīng)該用                                    作為探針。

（4）使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細胞內(nèi)，主要是借鑒                        的途徑。

(5) 目的基因表達成功后，“工程菌”明顯不同于細菌D。從變異的來源看，此變異屬于         

       。導(dǎo)入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標(biāo)志是什么?                    。

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科目：高中生物 來源：河北省衡水中學(xué)2009—2010學(xué)年度第二學(xué)期期中考試高二生物試卷 題型：綜合題

回答下列關(guān)于基因工程的問題：
如圖是將人的生長激素基因?qū)爰毦鶥細胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用載體為質(zhì)粒A。已知細菌B細胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細菌B后，其上的基因能得到表達，根據(jù)圖示所給信息回答下列問題：

(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒時，用同一種限制性內(nèi)切酶分別切割目的基因和質(zhì)粒，露出相同的黏性末端，將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的            ，使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。
(2)目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細菌細胞時，效率還不高；導(dǎo)入完成后得到的細菌，實際上有的根本沒有導(dǎo)入質(zhì)粒；有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A；只有少數(shù)導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細菌是否導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒：
將得到的細菌涂抹在一個含有               的培養(yǎng)基上，能夠生長的就是導(dǎo)入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的，反之則沒有。此過程中體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須具備的兩個條件                     ；                                           。
(3)若進一步鑒定證明細菌中導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A還是重組質(zhì)粒，將得到的細菌涂抹在一個含有
               的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，若細菌               ，則導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程，應(yīng)該用                                   作為探針。
（4）使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細胞內(nèi)，主要是借鑒                       的途徑。
(5)目的基因表達成功后，“工程菌”明顯不同于細菌D。從變異的來源看，此變異屬于         
      。導(dǎo)入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標(biāo)志是什么?                   。

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科目：高中生物 來源：2012-2013學(xué)年江蘇省高三最后一次模擬考試生物試卷 題型：綜合題

回答下列關(guān)于基因工程的問題。

草甘膦是一種廣譜除草劑，其除草機制是抑制植物體內(nèi)EPSPS酶的合成，最終導(dǎo)致植物死亡。但是，它的使用有時也會影響到植物的正常生長。目前，已發(fā)現(xiàn)可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因，若將該基因轉(zhuǎn)入植物細胞內(nèi)， 從而獲得的轉(zhuǎn)基因植物就能耐受高濃度的草甘膦。

下圖A-F表示6株植物，其中，植物A和D對草甘膦敏感，B和E對草甘膦天然具有抗性，C和F則經(jīng)過了轉(zhuǎn)基因處理，但是是否成功還未知。圖1和2分別表示兩段DNA序列。表格中1-4分別表示4種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點。據(jù)圖回答下列問題：

（1）若A-C澆清水，D-F澆的水中含有草甘膦，上述植物中，肯定能健康成長的是_________。

（2）若要從大腸桿菌中篩選出含EPSPS基因的突變菌株甲，在大腸桿菌培養(yǎng)基中還必須加入 ___________。

（3）假設(shè)位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列均如圖1所示，則應(yīng)選擇表中酶__________進行酶切；若位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列分別如圖1和2所示，則應(yīng)選擇表中酶__________ 進行酶切。

（4）假設(shè)大腸桿菌突變菌株甲中EPSPS基因的右側(cè)序列如圖2所示，請在方框內(nèi)畫出經(jīng)酶切后產(chǎn)生的兩個末端的堿基序列。（2分）

（5）假設(shè)EPSPS基因已被成功轉(zhuǎn)移到植物F中，但植物F仍沒有表現(xiàn)出抗性，分析可能的原因_____________。

下圖甲是某目的基因（4.0kb，1kb=1000對堿基）與大腸桿菌pUC18質(zhì)粒（2.7kb）重組的示意圖。圖中Ap′是抗氨芐青霉素基因，lacZ是顯色基因，其上的EcoRI識別位點位于目的基因插入位點的右側(cè)，其控制合成的物質(zhì)能使菌落呈現(xiàn)藍色。（圖乙中深色圓點即為藍色菌落）

（6）圖乙的培養(yǎng)基中含有氨芐青霉素，請判斷圖乙中所出現(xiàn)的白色和藍色兩種菌落中，何種會含有重組質(zhì)粒。___________。

（7）現(xiàn)用EcoRI酶切質(zhì)粒，酶切后進行電泳觀察，若出現(xiàn)長度為_________kb和       kb的片段，則可以判斷該質(zhì)粒已與目的基因重組成功。（重組質(zhì)粒上目的基因的插入位點與EcoRI的識別位點之間的堿基對忽略不計）

 

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科目：高中生物 來源：河北省2009—2010學(xué)年度第二學(xué)期期中考試高二生物試卷 題型：綜合題

回答下列關(guān)于基因工程的問題：

如圖是將人的生長激素基因?qū)爰毦鶥細胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用載體為質(zhì)粒A。已知細菌B細胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細菌B后，其上的基因能得到表達，根據(jù)圖示所給信息回答下列問題：

(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒時，用同一種限制性內(nèi)切酶分別切割目的基因和質(zhì)粒，露出相同的黏性末端，將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的             ，使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。

(2)目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細菌細胞時，效率還不高；導(dǎo)入完成后得到的細菌，實際上有的根本沒有導(dǎo)入質(zhì)粒；有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A；只有少數(shù)導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細菌是否導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒：

將得到的細菌涂抹在一個含有                的培養(yǎng)基上，能夠生長的就是導(dǎo)入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的，反之則沒有。此過程中體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須具備的兩個條件                      ；                                            。

(3)若進一步鑒定證明細菌中導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A還是重組質(zhì)粒，將得到的細菌涂抹在一個含有

                的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，若細菌                ，則導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程，應(yīng)該用                                    作為探針。

（4）使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細胞內(nèi)，主要是借鑒                        的途徑。

(5) 目的基因表達成功后，“工程菌”明顯不同于細菌D。從變異的來源看，此變異屬于         

       。導(dǎo)入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標(biāo)志是什么?                    。

 

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