Question

氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，因其不易降解，會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表1。

圖1

表1　培養(yǎng)基的組成

 

液體培養(yǎng)基	蛋白胨	牛肉膏	氯苯	氯化鈉	硝酸銨	無機(jī)鹽(無碳)	蒸餾水
Ⅰ號(hào)	10 g	5 g	5 mg	5 g	—	—	1L
Ⅱ號(hào)	—	—	50 mg	5 g	3 g	適量	1L
Ⅲ號(hào)	—	—	20～80 mg	5 g	3 g	適量	1L

(1)配制Ⅱ號(hào)固體培養(yǎng)基時(shí)，除添加Ⅱ號(hào)液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的________。

(2)培養(yǎng)基配制時(shí)，滅菌與調(diào)pH的先后順序是____________

________________________________________________________________________。

(3)從用途上來說，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基和Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基分別屬于______培養(yǎng)基和________培養(yǎng)基。在Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是________。

(4)在營(yíng)養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí)，SP1的菌體會(huì)變成一個(gè)圓形的休眠體，這種休眠體，被稱為________。

(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長(zhǎng)曲線(如圖2)。從圖2可知，SP1菌在________培養(yǎng)條件下最早停止生長(zhǎng)，其原因是_________________。

圖2

 

Answer 1

　(1)瓊脂　(2)先調(diào)pH，后滅菌　(3)通用　選擇

硝酸銨　(4)芽孢　(5)20 mg/L氯苯　碳源最早耗盡

 

配制固體培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)在液體培養(yǎng)基的成分中再加入瓊脂作為凝固劑。在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，后進(jìn)行滅菌，防止滅菌后在調(diào)節(jié)pH的過程中污染培養(yǎng)基。據(jù)表可知，培養(yǎng)基Ⅰ為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，包括碳源、氮源、水、無機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子，適用于多種微生物的培養(yǎng)。培養(yǎng)基Ⅱ不加牛肉膏和蛋白胨，以硝酸銨為氮源，可以選擇出以硝酸銨為氮源的微生物，是選擇培養(yǎng)基。在營(yíng)養(yǎng)缺乏、環(huán)境惡劣時(shí)，微生物可以形成休眠體—芽孢，來度過不良環(huán)境。據(jù)圖2可知，SP1菌在20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件下菌體數(shù)最早達(dá)到最大值，即最早停止生長(zhǎng)，原因是在培養(yǎng)基Ⅲ中，氯苯是唯一碳源，由于20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件氮源最少，因此也最早被耗盡，使SP1菌停止生長(zhǎng)。