Question

【題目】圖1表示“華恢1號”抗蟲水稻主要培育流程，據(jù)圖1回答：
（1）殺蟲基因通過①～④，最終在宿主細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程叫做 ．
（2）組建理想的載體需要對天然的質(zhì)粒進行改造．圖2是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制酶作用位點），據(jù)圖2分析： ①人工改造質(zhì)粒時，要使抗蟲基因能成功表達，還應(yīng)插入 ．
②人工改造質(zhì)粒時，用限制酶Ⅰ處理，其目的是：
第一，去除質(zhì)粒上（基因），保證T﹣DNA進入水稻細胞后不會促進細胞的分裂和生長；
第二，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點，有利于 ．
第三，使質(zhì)粒大小合適，可以提高轉(zhuǎn)化效率等．
③若用限制酶Ⅱ分別切割經(jīng)過②過程改造的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒．分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲基因的水稻胚細胞，觀察到的細胞生長的情況是 ．
（3）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端為 ，則該酶識別的核苷酸序列是 ．

Answer 1

【答案】
（1）轉(zhuǎn)化
（2）啟動子；tms和tmr；目的基因（或外源DNA）準確插入；在含卡那霉素的培養(yǎng)基中能夠生長,而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長
（3）GACGTC
【解析】解：（1）轉(zhuǎn)化是指目的基因進人受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，圖中①～④表示該過程．（2）①啟動子是一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需要的蛋白質(zhì)．②圖中看出，tms基因能夠編碼生長素，tmr基因能夠編碼細胞分裂素，這兩種激素能夠促進植物的生長．因此人工改造時用限制酶Ⅰ處理，其目的之一是除去或破壞質(zhì)粒上的tmr、tms，保證T﹣DNA進入水稻細胞后不會引起細胞的無限分裂和生長；另外只有一個插入位點，也有利于目的基因（或外源DNA）準確插入．③若用限制酶Ⅱ切割改造過的理想質(zhì)粒，質(zhì)粒上的抗四環(huán)素的標記基因（tet）就會破壞，所以以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，在含卡那霉素的培養(yǎng)基能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長．（3）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端為 ，則該酶識別的核苷酸序列是GACGTC．

所以答案是：（1）轉(zhuǎn)化（2）①啟動子②tms和tmr　目的基因（或外源DNA）準確插入③在含卡那霉素的培養(yǎng)基中能夠生長，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長（3）GACGTC

【考點精析】通過靈活運用基因工程的原理及技術(shù)，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)即可以解答此題．