Question

【題目】柴油是重要的燃料油之一，也因泄露與不當排放等造成了嚴重的環(huán)境污染．科研人員從遭受柴油污染的土壤樣品中取土樣5g，加入含100mL培養(yǎng)基M的錐形瓶中，在30℃條件下震蕩培養(yǎng)5天，取出5mL培養(yǎng)液接種到相同的新鮮培養(yǎng)基，按此步驟連續(xù)培養(yǎng)5次，分離獲得醋酸鈣不動桿菌DB（一中柴油降解菌）．利用該菌，科研人員進一步探索其降解柴油的最佳條件，獲得實驗結果如圖．請回答下列問題：
（1）為獲得醋酸鈣不動桿菌DB，培養(yǎng)基M應以為唯一碳源，還要考慮無機鹽的和比例．
（2）在實驗過程中，科研人員“30℃條件下震蕩培養(yǎng)5天，取出5mL培養(yǎng)液接種到相同的新鮮培養(yǎng)基，按此步驟，連續(xù)培養(yǎng)5次”的主要目的是 ．
（3）在分離醋酸鈣不動桿菌DB操作時，在嚴格無菌條件下，采用（填接種方法）在制備好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上進行接種，接種完，對接種環(huán)進行滅菌處理．培養(yǎng)一段時間后，觀察、挑取平板上形態(tài)、顏色、大小和隆起度等一致的進行重復培養(yǎng)，直到分離出單一菌株．
（4）據(jù)圖分析，若某地區(qū)土壤發(fā)生柴油重度污染時，則可以將 ， 并添加濃度為的表面活性劑，以有利于提高對柴油的降解效果．

Answer 1

【答案】
（1）柴油；種類
（2）使醋酸鈣不動桿菌DB的數(shù)量增加（或使柴油分解菌富集）
（3）平板劃線法；灼燒；菌落
（4）對被柴油重度污染的土壤進行稀釋，使柴油濃度降低至4000mg．kg﹣1左右；6mg．g﹣1
【解析】解：（1）分析題意可知，醋酸鈣不動桿菌DB是一種柴油降解菌，因此為獲得醋酸鈣不動桿菌DB，培養(yǎng)基M應以柴油為唯一碳源，還要考慮無機鹽的種類和比例．（2）在實驗過程中，科研人員“30℃條件下震蕩培養(yǎng)5天，取出5mL培養(yǎng)液接種到相同的新鮮培養(yǎng)基，按此步驟，連續(xù)培養(yǎng)5次”的主要目的是使醋酸鈣不動桿菌DB的數(shù)量增加（或使柴油分解菌富集）．（3）在分離醋酸鈣不動桿菌DB操作時，在嚴格無菌條件下，采用平板劃線法或稀釋涂布平板法在制備好的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上進行接種，接種完，對接種環(huán)進行灼燒滅菌處理．培養(yǎng)一段時間后，觀察、挑取平板上形態(tài)、顏色、大小和隆起度等一致的菌落進行重復培養(yǎng)，直到分離出單一菌株．（4）根據(jù)柱形圖結果可知，在柴油添加量為4000mg．kg﹣1左右柴油的降解率最高，表面活性劑的濃度為6mg．g﹣1時降解率最高，因此若某地區(qū)土壤發(fā)生柴油重度污染時，則可以將對被柴油重度污染的土壤進行稀釋，使柴油濃度降低至4000mg．kg﹣1左右，并添加濃度為6mg．g﹣1的表面活性劑，以有利于提高對柴油的降解效果． 所以答案是：（1）柴油 種類（2）使醋酸鈣不動桿菌DB的數(shù)量增加（或使柴油分解菌富集）（3）平板劃線法 灼燒 菌落（4）對被柴油重度污染的土壤進行稀釋，使柴油濃度降低至4000mg．kg﹣1左右 6mg．g﹣1