Question

下圖是利用基因工程技術生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖，請據(jù)圖作答。

（1）能否利用人的皮膚細胞來完成①過程？　　 。原因是　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　。

（2）過程②稱為　　　　　　　　　 。

（3）為使過程⑧更易進行，可用　　　 處理D。為了檢測大腸桿菌是否產(chǎn)生了人胰島素，可采用的方法是　　　　　　　　　 。

（4）下圖為上圖中質(zhì)粒B的簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，amp^R為青霉素抗性基因，tct^R為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點。

①將用EcoRI切割后的目的基因與質(zhì)粒用DNA連接酶進行連接，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有　　 種。

②將上述連接產(chǎn)物導入無任何抗藥性的大腸桿菌細胞中然后接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的大腸桿菌所含有的連接產(chǎn)物是 。

③在上述實驗中，為了防止目的基因和質(zhì)粒在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是　　　　　　　　 。

（5）若要使A在體外通過③④⑤過程擴增，那么在此過程中所使用的酶是　　　　　　 。除酶外還需要加入引物，其作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　 。

（6）如果用該技術將一個位于DNA一端的目的基因進行擴增，那么連續(xù)擴增4次后，只含目的基因的DNA占全部DNA的比例是　　 　　 。

Answer 1

（1）不能  皮膚細胞中的胰島素基因未表達（或未轉(zhuǎn)錄），不能形成胰島素mRNA

（2）反轉(zhuǎn)錄    （3）Ca²⁺   抗原-抗體雜交  （4）①  3     ②目的基因--質(zhì)粒連接物、質(zhì)粒--質(zhì)粒連接物     

 ③EcoRI和BamHI

（5）耐熱DNA聚合酶

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸

（6）11/16