Question

根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí),回答下列問題:

(1)限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段,其末端類型有 和 。

(2)質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下:

AATTC……G

G……CTTAA

為使運(yùn)載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點(diǎn)是 。

(3)按其來源不同,基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類,即 DNA連接酶和 DNA連接酶。

(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是 ,產(chǎn)物是 。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,常采用 技術(shù)。

(5)基因工程中除質(zhì)粒外, 和 也可作為運(yùn)載體。

(6)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,一般情況下,不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,原因是  。

 

Answer 1

(1)黏性末端 平末端

(2)切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的黏性末端相同

(3)大腸桿菌(E·coli) T4 (4)mRNA(或RNA) cDNA(或DNA) PCR (5)噬菌體 動(dòng)植物病毒 (6)未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力極弱

【解析】(1)當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時(shí),產(chǎn)生的是黏性末端,而當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線處切開時(shí),產(chǎn)生的則是平末端。(2)為使運(yùn)載體與目的基因相連,不同的限制酶應(yīng)切割出相同的黏性末端,它們必須要能識(shí)別相同的核苷酸序列,并且使每條鏈中相同的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。(3)根據(jù)酶的來源不同,DNA連接酶分為兩類:一類是從大腸桿菌中分離得到的,稱為E·coli DNA連接酶;另一類是從T4噬菌體中分離出來的,稱為T4DNA連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄是以RNA為模板來合成DNA的過程�？梢栽隗w外短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增DNA的技術(shù)叫PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))。(5)基因工程中除質(zhì)粒外,還有λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等。(6)大腸桿菌細(xì)胞外有細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,能阻止其他物質(zhì)的進(jìn)入,可通過Ca2+處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞。