Question

14．以下是生物學技術制備抗體的兩個途徑模式簡圖．

（1）上圖中過程①的完成采用的方法有：用聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒，依據的生物學原理細胞膜具有流動性；
（2）過程④要用到的酶有逆轉錄酶、DNA聚合酶，過程⑥采用的方法叫鈣離子處理．
上圖中的質粒本身含有氨芐青霉素抗性基因和M、N兩種限制酶（兩種酶切割序列完全不同）切割位點．若用限制酶M和N切割，通過凝膠電泳分離，分析得如下表．

分子量（kb）	1.0	2.0	3.0	4.0	5.0	6.0	7.0	8.0	9.0	10.0
酶M	+				+					+
酶N							+		+
酶M+酶N	+	+	+	+		+
凝膠電泳結果（1kb=1000對堿基，+表示檢測到該片段的存在

（3）該質粒長度為16kb，在該質粒中，M酶與N酶的切割點分別有3、2個．
（4）氨芐青霉素抗性基因的作用是作為標記基因（鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細胞篩選出來）．
（5）在表達載體中，啟動子的作用是：RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動Ⅵ基因的轉錄．

Answer 1

分析 1、據圖分析，細胞A表示效應B細胞，細胞Y表示雜交瘤細胞，結構甲表示基因表達載體，①過程表示動物細胞融合，②過程表示雜交瘤細胞的培養(yǎng)，③過程表示提取信使RNA，④過程表示逆轉錄，⑤表示基因表達載體的構建，⑥表示導入受體細胞．
2、分析表格和審清題意是解答本題的切入點．題干中提出，mtDNA是存在于人類細胞線粒體中雙鏈閉合環(huán)狀的DNA分子，因此限制酶在切割時，用酶M得到3個片段，則有3個切點，用酶N得到2個片段，則有2個切點．

解答 解：（1）上圖中過程①過程表示動物細胞融合，采用的方法有：用聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒，依據的生物學原理細胞膜具有流動性；
（2）過程④表示逆轉錄，需要逆轉錄酶、DNA聚合酶，過程⑥將目的基因導入微生物采用的方法叫鈣離子處理法．
（3）該mtDNA為環(huán)狀DNA，用酶M得到3個片段，則有3個切點，用酶N得到2個片段，則有2個切點．用酶N切割得到2個片段的長度分別為7和9，則該mtDNA的長度為16Kb．
（4）氨芐青霉素抗性基因的作用是作為標記基因（鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細胞篩選出來）．
（5）在表達載體中，啟動子的作用是RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動Ⅵ基因的轉錄．
故答案為：
（1）①用聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒   ②細胞膜具有流動性
（2）③逆轉錄酶、DNA聚合酶  ④鈣離子處理
（3）⑤16   ⑥3  ⑦2
（4）⑧作為標記基因（鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細胞篩選出來）
（5）⑨RNA聚合酶   ⑩轉錄

點評 本題結合圖表，考查單克隆抗體的制備、基因工程的原理及技術，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟的細節(jié)，能結合圖中和表中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．