Question

【題目】植物在培養(yǎng)過程中容易被病毒感染，且病毒的DNA隨細胞的分裂而復制。莖尖分生區(qū)細胞一般來說不含病毒，莖尖培養(yǎng)脫毒法已經成為植物無毒苗生產中應用最廣泛的一種方法。請回答下列有關脫毒苗培育和檢測的相關問題：

（1）利用莖尖培養(yǎng)脫毒苗依據的生物學原理是______________，培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中需要加入的植物激素有_____________。植物莖尖分生區(qū)細胞一般不含病毒，原因可能是__________________。

（2）RT–PCR技術以mRNA為模板合成cDNA，再進行PCR擴增，可用于檢測植物病毒。利用mRNA合成cDNA時，反應體系中需要加入的原料是_________；加入RNA酶抑制劑，目的是_________。PCR過程中除了加入DNA模板外，還需要加入合成的短序列的DNA單鏈作為_________。

（3）可以用單克隆抗體檢測脫毒苗是否含有病毒，制備單克隆抗體時要先用病毒的抗原多次免疫小鼠，再提取小鼠的_________兩種細胞進行融合。單克隆抗體用于檢測植物病毒的突出優(yōu)點是_________。

Answer 1

【答案】植物細胞的全能性 生長素和細胞分裂素 莖尖分生區(qū)細胞的分裂速度比病毒的復制速度快 4種脫氧核苷酸 防止mRNA被RNA酶催化水解 引物 B淋巴細胞和骨髓瘤細胞 特異性強、靈敏度高

【解析】

1、植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據的原理是植物細胞的全能性。

2、植物組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基中添加的生長素和細胞分裂素的作用是啟動細胞進行有絲分裂，誘導離體的組織或細胞經過脫分化形成愈傷組織，再經過再分化形成幼苗。

3、單克隆抗體的特異性強，針對性更高，靈敏度高，產量也大大高于血清抗體。

（1）利用植物莖尖培養(yǎng)脫毒苗使用的技術是植物組織培養(yǎng)，植物組織培養(yǎng)依據的原理是植物細胞的全能性。植物組織培養(yǎng)過程中需要加入的激素是生長素和細胞分裂素。根據題意可知，病毒的DNA隨細胞的分裂而復制，莖尖分生區(qū)細胞的分裂速度比病毒的復制速度快，所以莖尖分生區(qū)細胞一般來說不含病毒。

（2）提取mRNA合成cDNA是逆轉錄過程，需要逆轉錄酶和4種脫氧核苷酸；加人RNA酶抑制劑能防止mRNA被RNA酶催化水解。PCR過程中加入的短序列的DNA單鏈作為引物，以便擴增目的基因。

（3）單克隆抗體培養(yǎng)時應選擇B淋巴細胞和骨髓瘤細胞進行融合，單克隆抗體用于檢測植物病毒的突出優(yōu)點在于特異性強、靈敏度高。