Question

綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，一直作為一個(gè)監(jiān)測(cè)完整細(xì)胞和鲴織內(nèi)基因表達(dá)及蛋白質(zhì)位置的理想標(biāo)記。請(qǐng)根據(jù)圖表回答下列問(wèn)題。

（1）若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的堿基序列是—TGCA—，則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時(shí)，應(yīng)選用的限制酶是__________。③過(guò)程需要的酶是__________。

（2）④過(guò)程將基因表達(dá)載體導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞常用的方法是__________。

（3）檢測(cè)GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上，可采用__________技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。

（4）用顯微鏡可觀察到用于⑥過(guò)程的豬卵母細(xì)胞的卵黃膜和透明帶之間有__________個(gè)極體。用于⑤過(guò)程的豬胎兒成纖維細(xì)胞，一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是__________。

（5）由⑦過(guò)程獲得的重組細(xì)胞培育成綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬，涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)手段有__________。

（6）為了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。若對(duì)⑧過(guò)程得到的囊胚階段胚胎進(jìn)行分割，要注意__________。得到綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬（雌性）之后，可用__________處理，使之超數(shù)排卵，提高其繁育能力。

 

Answer 1

【答案】

 

【解析】本題綜合考查了基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，屬于對(duì)識(shí)記、理解層次的考查。能與—TCGA—互補(bǔ)配對(duì)的是—AGCT--，能與—TCGA--互補(bǔ)配對(duì)的是—ACGT--，則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時(shí)，應(yīng)選用的限制酶是HindⅢ和PartⅠ。目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞常用的方法為顯微注射法。檢測(cè)目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞的方法為DNA分子雜交。傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞遺傳物質(zhì)不會(huì)變化。