正當(dāng)中國(guó)各界激烈爭(zhēng)論轉(zhuǎn)基因水稻安全問(wèn)題之際,在菲律賓首都馬尼拉郊外的一片稻田里,一種被稱為“金色大米”的轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)悄然收獲。這種轉(zhuǎn)基因大米可以幫助人們補(bǔ)充每天必需的維生素A。由于含有可以生成維生素A的β一胡蘿卜素.它呈現(xiàn)金黃色澤,故稱“金色大米”。(摘自20l0年4月<新世紀(jì)>周刊) “金色大米”的培育流程如圖所示.請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(已知酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一G ↓ GATCC一.酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一↓ GATC—)。
(1)圖中a、b所示獲得目的基因的方法是?????????? ,培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中,其核心是??????????????????? 。圖中c稱作?????????? ,它的構(gòu)成除了復(fù)制原點(diǎn)、目的基因外,還必須有????????? 、?????????? 、??????????? 等。
(2)據(jù)圖分析,在構(gòu)建c的過(guò)程中,目的基因用???????? (限制酶Ⅰ或限制酶Ⅱ)進(jìn)行了切割。檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功需要利用???????????????????????? 作為標(biāo)記基因。
(3)過(guò)程e運(yùn)用了細(xì)胞工程中的?????????? 技術(shù),該技術(shù)的理論依據(jù)是??????????????? ;在該技術(shù)應(yīng)用的過(guò)程中,關(guān)鍵步驟是利用含有一定營(yíng)養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導(dǎo)植物細(xì)胞進(jìn)行?????? 和???????????? 。
(4)若希望該轉(zhuǎn)基因水稻生產(chǎn)的“金色大米”含維生素A含量更高、效果更好,則需要通過(guò)? ??? 工程手段對(duì)合成維生素A的相關(guān)目的基因進(jìn)行設(shè)計(jì)。
(除注明外,每空1分,共15分)
(1)反轉(zhuǎn)錄法(逆轉(zhuǎn)錄合成)? 基因表達(dá)載體的構(gòu)建? 基因表達(dá)載體(或重組質(zhì)粒,重組DNA分子)??? 啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因
(2)限制酶Ⅱ(2分) 基因I(2分)
(3)植物組織培養(yǎng)??? 細(xì)胞全能性??? 脫分化 ?? 再分化
(4)蛋白質(zhì)
【解析】
試題分析:(1)由DNA→mRNA→目的基因?yàn)榉崔D(zhuǎn)錄法;蚬こ痰暮诵氖腔虮磉_(dá)載體的構(gòu)建。圖中c為基因表達(dá)的載體。作為基因表達(dá)的載體必須有啟動(dòng)子、目的基因、標(biāo)記基因、終止子等。(2) 酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一G ↓ GATCC一, 酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一↓ GATC—;由目的基因兩端的序列可知應(yīng)該用限制酶Ⅱ切割。對(duì)質(zhì)粒應(yīng)該用限制酶Ⅰ切割,不能用限制酶Ⅱ切割,因?yàn)橛?/span>限制酶Ⅱ切割會(huì)破壞標(biāo)記基因Ⅰ和Ⅱ,而用限制酶Ⅰ切割只會(huì)破壞標(biāo)記基因Ⅱ。所以檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功需要利用基因Ⅰ作為標(biāo)記基因。(3)由含目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植物需用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論依據(jù)是植物細(xì)胞的全能性。植物組織培養(yǎng)過(guò)程包括脫分化和再分化。(4)若希望該轉(zhuǎn)基因水稻生產(chǎn)的“金色大米”含維生素A含量更高、效果更好,則可通過(guò)蛋白質(zhì)工程手段對(duì)合成維生素A的相關(guān)目的基因進(jìn)行設(shè)計(jì)。
考點(diǎn):本題考查基因工程、蛋白質(zhì)工程知識(shí),意在考查對(duì)知識(shí)的識(shí)記及理解應(yīng)用。
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