Question

【題目】甜蛋白是一種高甜度的特殊蛋白質。為了改善黃瓜的品質，科學家采用農桿菌轉化法將一種甜蛋白基因成功導入黃瓜細胞，得到了轉基因植株�；卮鹣铝袉栴}：

（1）用農桿菌感染時，應優(yōu)先選用黃瓜________（填“受傷的”或“完好的”）葉片與含重組質粒的農桿菌共培養(yǎng)，選用這種葉片的理由是________________________。農桿菌轉化法通常適用于________植物。

（2）若在轉基因黃瓜中檢測到這種甜蛋白，則表明該重組質粒中________已轉移到植物細胞中且能夠表達；用該轉基因黃瓜的某一植株與多株非轉基因植株雜交，發(fā)現(xiàn)子代中含甜蛋白個體數(shù)與不含甜蛋白個體數(shù)之比均為1∶1，則說明甜蛋白基因已經整合到________（填“核基因組”“線粒體基因組”或“葉綠體基因組”）中。

（3）檢測發(fā)現(xiàn)，轉入的甜蛋白基因在黃瓜細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設計了與甜蛋白基因結合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按如圖方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。

① 這是一種________技術。

② 圖中所示的4次PCR都涉及到引物的選擇，其中PCR1選擇的引物是________（填字母，下同），PCR2選擇的引物是________。

A． 引物A　　　B． 引物B

C． 引物C D． 引物D

（4）假設某種轉基因作物因為受到病毒感染而減產，若要以該轉基因作物的叢芽、胚狀體為材料獲得脫毒苗，則脫毒苗具備________________的優(yōu)點，因此品質好，產量高。

Answer 1

【答案】受傷的 葉片傷口處的細胞釋放出大量酚類物質，可吸引農桿菌移向這些細胞 雙子葉和裸子 甜蛋白基因 核基因組 定點誘變 AB CD 不帶病毒

【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）由于葉片傷口處的細胞釋放出大量酚類物質，可吸引農桿菌移向這些細胞，因此用農桿菌感染時，應優(yōu)先選用黃瓜受傷的葉片與含重組質粒的農桿菌共培養(yǎng)。農桿菌轉化法通常適用于雙子葉和裸子植物。
（2）若在轉基因黃瓜中檢測到這種甜蛋白，則表明該重組質粒中甜蛋白基因已轉移到植物細胞中且能夠表達；用該轉基因黃瓜的某一植株與一株非轉基因植株雜交，發(fā)現(xiàn)子代中含甜蛋白個體數(shù)與不含甜蛋白個體數(shù)之比為1：1，遵循基因的分離定律，則說明甜蛋白基因已經整合到核基因組中。
（3）①根據題意和圖示分析，經過4次PCR技術后獲得了新的基因，這是一種定點的基因突變技術。
②研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設計了與蛋白A基因結合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），因此4次PCR應該分別選擇如圖所示的引物：如下表所示

（4）脫毒苗不攜帶病毒而使得產品品質好產量高。