【題目】采用微生物技術(shù)處理秸稈是當(dāng)前研究最多的一種秸稈處理方法,而篩選具有高活性纖維素酶的秸稈降解微生物菌株以及相關(guān)研究是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。研究人員從木材廠附近的腐爛朽木及土壤的特殊環(huán)境中篩選到一株產(chǎn)堿性纖維素酶的菌株LT3,并對其產(chǎn)酶條件進(jìn)行了初步優(yōu)化。具體實(shí)驗(yàn)如下:
取l g樣品粉末置于無菌三角瓶(含30 mL富集培養(yǎng)基)中,25 ℃和220 r/min下,震蕩培養(yǎng)48 h。取富集后的培養(yǎng)液按10-2、10-3、lO-4、1O-5、10-6配制不同梯度稀釋液,分別涂布于平板中,28 ℃下恒溫培養(yǎng)65 h后經(jīng)剛果紅染色得到菌落周圍有明顯透明水解圈的菌株,再接種于斜面培養(yǎng)基中25 ℃培養(yǎng)48 h,然后4 ℃低溫保存。最后將得到的產(chǎn)纖維素酶菌株接種環(huán)到液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中發(fā)酵,測定初酶液的CMC酶活性和濾紙酶活性,最終以酶活性作為篩選纖維素酶高產(chǎn)菌的標(biāo)準(zhǔn),篩選CMC酶活性和濾紙酶活性高的菌株。
請回答以下相關(guān)問題:
(1)使用以上純化方法的目的是 。
(2)若在1O-5下分別移取0.1 mL涂布到3個(gè)平板中觀察到26、240、280個(gè)菌落,則每克樣品中含有的細(xì)菌數(shù)目為 個(gè)。
(3)恒溫培養(yǎng)時(shí),平板應(yīng)倒置,原因是 。
(4)在加入剛果紅染色后需加入1 mol/L的NaCl溶液,作用是 ,這種染色方法的弊端是 。
(5)若將LT3菌株于不同的pH的發(fā)酵培養(yǎng)基中30 ℃下震蕩培養(yǎng)72 h,于酶活性鑒定板中觀察其透明圈大小。結(jié)果如下表和圖1:
表 pH對LT3菌株纖維素活性的影響
pH | 5.5 | 7.0 | 8.5 |
CMC酶活性(U/mL) | 12.30 | 13.49 | 12.36 |
圖1 LT3菌株pH優(yōu)化水解圈大小
由表和圖1可以得出的結(jié)論是 。
(6)將LT3菌株接種到甘蔗渣為碳源的培養(yǎng)基中,30 ℃下震蕩培養(yǎng)48 h、72 h、96 h、116 h、135 h,分別測定CMC酶活性和濾紙酶活性,結(jié)果如圖2。
結(jié)果表明:LT3菌株同時(shí)獲得較高CMC酶活性和濾紙酶活性的發(fā)酵時(shí)間為 h左右。
【答案】
(1)將聚集在一起的細(xì)菌分散成單個(gè)細(xì)胞,形成單菌落(2分)
(2)2.6×108
(3)既可使培養(yǎng)基表面水分更好地?fù)]發(fā),又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染(2分)
(4)洗去多余的染液 不僅操作繁瑣,而且往往使菌落之間發(fā)生混雜(2分)
(5)pH為7.0時(shí)透明圈最大,CMC酶活性最高
(6)120
【解析】
(1)根據(jù)題干,這是稀釋涂布平板法進(jìn)行純化,目的是將聚集在一起的細(xì)菌分散成單個(gè)細(xì)胞,形成單菌落。(2)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在30-300個(gè)之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),而且26和240、280差異過大,計(jì)算時(shí)應(yīng)舍棄。再根據(jù)教材公式,該樣品中含有的細(xì)菌數(shù)目=[(240+280)/(2×0.1)] ×105=2.6×108。(3)恒溫培養(yǎng)時(shí),平板應(yīng)倒置的原因是既可使培養(yǎng)基表面水分更好地?fù)]發(fā),又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。
(4)在加入剛果紅染色后需加入1 mol/L的NaCl溶液,其作用是洗去多余的染液,這種染色方法由于是培養(yǎng)后加剛果紅染液,染色后要倒掉,再加NaCl洗去染液后再倒掉,這樣不僅操作繁瑣,而且往往使菌落之間發(fā)生混雜。
(5)由題圖、表可知,pH為7.0時(shí)透明圈最大,CMC酶活性最高。(6)根據(jù)坐標(biāo)曲線圖,很容易得到LT3菌株同時(shí)獲得較高CMC酶活性和濾紙酶活性的發(fā)酵時(shí)間為120 h左右。
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【題目】下列關(guān)于基因表達(dá)載體構(gòu)建的相關(guān)敘述,正確的是
A.以動物、植物或微生物細(xì)胞做受體細(xì)胞,基因表達(dá)載體的構(gòu)建是相同的
B.必須在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行
C.抗生素基因可作為標(biāo)記基因
D.λ噬菌體的衍生物、動植物病毒也可以做基因工程的載體
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【題目】下圖1表示幼苗在水平放置時(shí)的生長情況。圖2表示根和莖對不同濃度生長素的不同反應(yīng),則圖3中表示a、b兩點(diǎn)生長素濃度變化的曲線應(yīng)分別依次是
A.①和② B.①和③ C.②和③ D.②和④
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【題目】下列有關(guān)細(xì)胞生命活動的敘述不正確的是
A.漿細(xì)胞通過胞吐分泌抗體依賴于細(xì)胞膜的流動性
B.細(xì)胞中所有需能的生命活動都是由ATP直接供能
C.甲狀腺激素受體和溶菌酶可在人體同一種細(xì)胞中產(chǎn)生
D.激素、酶和神經(jīng)遞質(zhì)必須與特定的分子結(jié)合才能發(fā)揮作用
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【題目】下列雜交組合中,子代基因型種類數(shù)和表現(xiàn)型種類數(shù)相同的一組是: ( )
A.aaBb×AABB B.aabb×aaBb
C.aaBb×AABb D.AaBB×aaBb
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【題目】動物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)是( )
①細(xì)胞貼壁
②有絲分裂
③分散生長
④接觸抑制
⑤減數(shù)分裂
A. ①②④ B. ②④⑤ C. ①③④ D. ③④⑤
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【題目】生物體內(nèi)葡萄糖分解代謝過程的圖解如下:
據(jù)上圖可知,下列有關(guān)說法正確的是
A.反應(yīng)①②③④都可在人體細(xì)胞中進(jìn)行
B.糧食貯藏過程中,有時(shí)會發(fā)生糧堆濕度增大現(xiàn)象,這是因?yàn)楹粑饔卯a(chǎn)生水
C.反應(yīng)①②必須在有氧條件下進(jìn)行
D.上述反應(yīng)均在線粒體內(nèi)完成
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