(12分)PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)簡(jiǎn)稱,可以完成特定基因的體外復(fù)制,標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程如下圖,一次循環(huán),DNA含量就增加一倍,下圖為一次循環(huán)
(1)PCR中使雙鏈DNA模板的形成單鏈DNA,需要加熱,相當(dāng)于在細(xì)胞內(nèi)完成此過(guò)程中 的作用。
(2)在合成互補(bǔ)子鏈過(guò)程中,一般不使用DNA聚合酶,而使用Taq酶,請(qǐng)你根據(jù)圖解中有關(guān)信息確定最可能原因是Taq酶 。
(3)合成與模板互補(bǔ)的DNA鏈?zhǔn)且詃NTP(三磷酸脫氧核糖核苷酸)為原料,若用脫氧核糖核苷酸則不能形成互補(bǔ)的子鏈,dNTP可用簡(jiǎn)略用下圖解表示。
推測(cè):最終單個(gè)dNTP連接形成子代DNA鏈時(shí),要斷裂 個(gè)磷酸鍵,并同時(shí)為DNA鏈的形成提供 。
(4)若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝DNA分子上“X基因”,需在PCR反應(yīng)中加入兩種引物,兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如下圖1所示。經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后,產(chǎn)物如下圖2所示。則經(jīng) 輪循環(huán)后,產(chǎn)物中出現(xiàn)如下圖3所示DNA分子;此DNA分子共有 個(gè)。
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科目:高中生物 來(lái)源:2009─2010學(xué)年度黑龍江省大慶實(shí)驗(yàn)中學(xué)下學(xué)期期中考試高二年級(jí)生物試卷 題型:綜合題
(16分) PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫,利用PCR技術(shù)可對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。請(qǐng)根據(jù)下面PCR反應(yīng)原理示意圖回答有關(guān)問(wèn)題:
(1)PCR的原理是 。
(2)PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,需要的條件有:
① ② ③ ④ ⑤ ⑥Mg2+ ⑦緩沖液
(3)PCR技術(shù)使DNA解鏈?zhǔn)峭ㄟ^(guò) 實(shí)現(xiàn)的,而不需要 酶。 DNA的這種解鏈現(xiàn)象稱為DNA的 ,在一定的條件下是 (填寫“可逆的”或“不可逆的”)
(4)DNA解鏈后冷卻的目的是讓 與 相結(jié)合。
(5)當(dāng)溫度加熱至70―75 ℃時(shí),是 酶把 脫氧核苷酸,通過(guò) 鍵連接到引物上。如此逐漸延伸形成互補(bǔ)鏈,進(jìn)而使目的基因加倍。這一點(diǎn)體現(xiàn)了該酶與DNA連接酶的不同。
(6)通過(guò)重復(fù)循環(huán)(3)、(4)、(5)過(guò)程,使目的基因以 形式擴(kuò)增。
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科目:高中生物 來(lái)源:2010年黑龍江省高二下學(xué)期期中考試生物試題 題型:選擇題
下列說(shuō)法中正確的有幾項(xiàng)( )
(1)PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫,通過(guò)這一技術(shù),可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。
(2)在基因工程操作中,真正被用作載體的質(zhì)粒,都是在天然質(zhì);A(chǔ)上人工改造的。
(3)基因探針是mRNA序列的一段,其上一般具有放射性同位素標(biāo)記。
(4)基因治療包括體內(nèi)基因治療和體外基因治療。
A.一項(xiàng) B.兩項(xiàng) C.三項(xiàng) D.四項(xiàng)
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科目:高中生物 來(lái)源:2010年湖北省高一生物期末考試生物試題 題型:選擇題
(12分 )PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)簡(jiǎn)稱,可以完成特定基因的體外復(fù)制,標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程如下圖,一次循環(huán),DNA含量就增加一倍,下圖為一次循環(huán)
(1)PCR中使雙鏈DNA模板的形成單鏈DNA,需要加熱,相當(dāng)于在細(xì)胞內(nèi)完成此過(guò)程中 的作用。
(2)在合成互補(bǔ)子鏈過(guò)程中,一般不使用DNA聚合酶, 而使用Taq酶,請(qǐng)你根據(jù)圖解中有關(guān)信息確定最可能原因是Taq酶 。
(3)合成與模板互補(bǔ)的DNA鏈?zhǔn)且詃NTP(三磷酸脫氧核糖核苷酸)為原料,若用脫氧核糖核苷酸則不能形成互補(bǔ)的子鏈,dNTP可用簡(jiǎn)略用下圖解表示。
推測(cè):最終單個(gè)dNTP連接形成子代DNA鏈時(shí),要斷裂 個(gè)磷酸鍵,并同時(shí)為DNA鏈的形成提供 。
(4)若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝DNA分子上“X基因”,需在PCR反應(yīng)中加入兩種引物,兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如下圖1所示。經(jīng)過(guò)一次循環(huán)后,產(chǎn)物如下圖2所示。則經(jīng) 輪循環(huán)后,產(chǎn)物中出現(xiàn)如下圖3所示DNA分子;此DNA分子共有 個(gè)。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
(07蘇、錫、常、鎮(zhèn)四市聯(lián)考)下圖表示在生物體外獲取DNA(或目的基因)的兩種方式。
圖一示經(jīng)PCR技術(shù)擴(kuò)增獲取DNA的過(guò)程。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。PCR方法模仿體內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程,首先使DNA變性(加熱至94℃),兩條鏈解開(kāi)為單鏈;然后冷卻(至55℃)使引物(DNA復(fù)制時(shí)所需的約20個(gè)核苷酸的短鏈)與單鏈相應(yīng)堿基互補(bǔ)序列結(jié)合;再在熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)作用下進(jìn)行延伸(加熱至72℃),即以4種脫氧核苷酸為原料,在引物的引導(dǎo)下合成與模板互補(bǔ)的DNA新鏈。如果2條DNA單鏈各補(bǔ)上一條新鏈即成2個(gè)DNA。如此反復(fù)循環(huán),DNA以指數(shù)形式擴(kuò)增。上述過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中自動(dòng)完成。
圖二示反轉(zhuǎn)錄形成DNA的過(guò)程。即以mRNA為模板,反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的單鏈DNA,然后在酶的作用下合成雙鏈DNA。
請(qǐng)據(jù)圖分析回答:
(1)圖一中的DNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)是 ,它與人體內(nèi)的DNA聚合酶相比具有 特性。
(2)圖一A中的DNA解鏈過(guò)程在人體內(nèi)可由 催化完成。C過(guò)程復(fù)制方式的特點(diǎn)是 ,該過(guò)程需要 和能量等基本條件。
(3)圖二E中的堿基互補(bǔ)配對(duì)方式與圖一C中的不同之處是 。假設(shè)圖一中的一個(gè)模板DNA分子中有800個(gè)堿基對(duì),其中含有腺嘌呤600個(gè),若通過(guò)PCR技術(shù)共消耗周圍環(huán)境中游離的胞嘧啶脫氧核苷酸6200個(gè),則該模板DNA在PCR擴(kuò)增儀中已經(jīng)復(fù)制了 次。
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