Question

6．在“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)DNA提取量不足．下列有關(guān)原因分析不正確的是（　�。�

• A． 經(jīng)蒸餾水處理的紅細(xì)胞用玻璃棒攪拌的時間過短
• B． 溶解時所調(diào)制的NaCl溶液濃度未達(dá)到2mol/L
• C． DNA再溶解時，玻璃棒攪拌方向是單向的
• D． 向2mol/LNaCl溶液中加入蒸餾水太少

Answer 1

分析 1、DNA粗提取和鑒定的原理：
（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性．
（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色．
2、DNA粗提取和鑒定的過程：
（1）實(shí)驗(yàn)材料的選�。悍彩呛�有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對較高的生物組織，成功的可能性更大．
（2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液：
動物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液即可．如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液．
（3）去除濾液中的雜質(zhì)：
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同．
方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開；方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離．
（4）DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．
②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)．

解答 解：A、經(jīng)蒸餾水處理的紅細(xì)胞用玻璃棒攪拌的時間過短，部分細(xì)胞還未破裂，這會造成DNA的提取量不足，A正確；
B、NaCl溶液濃度在0.14～2mol/L時，隨著NaCl溶液濃度的升高，DNA的溶解度越大，因此溶解時所調(diào)制的NaCl溶液濃度未達(dá)到2mol/L時，部分DNA還沒有溶解，這會造成DNA的提取量不足，B正確；
C、DNA再溶解時，玻璃棒應(yīng)該沿著一個方向緩慢攪拌，這不會造成DNA提取量不足，C錯誤；
D、向2mol/LNaCl溶液中加入蒸餾水的目的是稀釋溶液，使DNA析出，若加入蒸餾水的量太少，稀釋度不夠，這會造成DNA的提取量不足，D正確．
故選：C．

點(diǎn)評 本題考查DNA的粗提取和鑒定，對于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)采用的方法、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等，需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累．