Question

【題目】已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原。疫苗的生產(chǎn)和抗體的制備流程如下圖所示。請(qǐng)回答下列問題：

（1）過程①代表的是____________，過程③構(gòu)建A基因重組載體時(shí)，啟動(dòng)子和終止子是重新構(gòu)建的，它們應(yīng)該能被受體細(xì)胞的__________所識(shí)別，以便于其催化轉(zhuǎn)錄過程。

（2）上圖為A基因的結(jié)構(gòu)示意圖，已知Ⅱ區(qū)的堿基數(shù)是2 000個(gè)，其中陰影區(qū)域堿基數(shù)是800個(gè)，空白區(qū)域中G和C的總數(shù)共有400個(gè)，則由該區(qū)域能指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的片段轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA中A和U總數(shù)是________個(gè)。

（3）在給小鼠皮下注射A蛋白時(shí)，要重復(fù)注射幾次的目的是通過二次免疫，增加小鼠體內(nèi)的______________數(shù)目。

（4）在將X進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)前，至少需要經(jīng)過2次篩選，第一次是將____________________篩選出來，第二次是將____________________________篩選出來。

（5）對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的__________來制備疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較，或用圖中的__________________與分離出的病毒進(jìn)行特異性檢測(cè)。

Answer 1

【答案】 逆轉(zhuǎn)錄 RNA聚合酶 400 漿細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 A蛋白 抗A蛋白的單克隆抗體

【解析】試題分析：梳理基因工程的基本操作步驟、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、單克隆抗體、基因的結(jié)構(gòu)及其轉(zhuǎn)錄等知識(shí)并形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合題意進(jìn)行相關(guān)試題的解答。

(1)過程①表示以RNA為模板合成DNA的逆轉(zhuǎn)錄過程。 啟動(dòng)子位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；終止子位于基因的尾端，具有終止轉(zhuǎn)錄的作用。因此過程③構(gòu)建A基因重組載體時(shí)，重新構(gòu)建的啟動(dòng)子和終止子都應(yīng)該能被受體細(xì)胞的RNA聚合酶識(shí)別。

(2) 依題意可知：A基因中能指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的片段即空白區(qū)域共含有2000－800＝1200個(gè)堿基，其中C＋G＝400個(gè)，A＋T＝1200－400＝800個(gè)。依堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，每條鏈上所對(duì)應(yīng)的該片段中A＋T＝400個(gè)。因mRNA是由該區(qū)域的一條鏈為模板，按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，通過轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生，所以由該區(qū)域轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA中A和U總數(shù)是400個(gè)。

(3) A蛋白為主要抗原。給小鼠皮下反復(fù)注射A蛋白的目的是增強(qiáng)小鼠的免疫能力，使機(jī)體產(chǎn)生較多的漿細(xì)胞。

(4) 在制備單克隆抗體的過程中，需要兩次篩選。第一次是利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；第二次是利用專一抗體陽(yáng)性檢測(cè)篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。

(5)在預(yù)防接種時(shí)，可以利用A蛋白作為抗原制備疫苗；或者從疑似患者體內(nèi)分離出病毒，與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較；或用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。