Question

【題目】【選修3:現(xiàn)代生物技術(shù)】

埃博拉病毒（EBO）呈纖維狀，病毒衣殼外有包膜，包膜上有5種蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最為關(guān)鍵，能被宿主細(xì)胞強(qiáng)烈識(shí)別�？蒲腥藛T利用該病毒進(jìn)行了一系列的研究。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）用GP蛋白作為疫苗比較安全，其原因是________________。

（2）生產(chǎn)疫苗過(guò)程中首先要獲得編碼GP蛋白抗原的基因，方法是先提取出病毒的RNA，再將RNA________，要大量獲得該基因，可釆用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，該項(xiàng)技術(shù)中需要用到__________酶，該酶需從__________的末端開(kāi)始催化子鏈的延伸。

（3）在基因?qū)�入牛受體細(xì)胞前，基因的首段必須含有使其僅能在牛的乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的________，才能驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。轉(zhuǎn)基因牛是否培育成功，可以通過(guò)________________技術(shù)從分子水平進(jìn)行檢測(cè)。

（4）科研人員也可以利用經(jīng)EBO免疫后小鼠的_____________與鼠的瘤細(xì)胞進(jìn)行融合成雜交瘤細(xì)胞，培養(yǎng)后可以獲得純凈的單一品種抗體，其特點(diǎn)是________________，可以用此抗體與藥物制成“生物導(dǎo)彈”，抗擊EBO。

Answer 1

【答案】 GP蛋白自身沒(méi)有感染能力 逆轉(zhuǎn)錄合成DNA 耐高溫的DNA聚合（Taq酶） 引物 （乳腺蛋白基因的）啟動(dòng)子 抗原—抗體雜交 B淋巴細(xì)胞 特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可能大量制備

【解析】試題分析：基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法；檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物目的基因是否表達(dá)--抗原-抗體雜交技術(shù)。單克隆抗體的制備流程：人工誘導(dǎo)經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過(guò)培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞得到單克隆抗體。

（1）用GP蛋白作為疫苗比較安全，其原因是GP蛋白自身沒(méi)有感染能力，但是保留有抗原性。

（2）RNA在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，逆轉(zhuǎn)錄成相應(yīng)的DNA。PCR技術(shù)需要耐高溫的DNA聚合（Taq酶）的催化，該酶需從引物的末端開(kāi)始催化子鏈的延伸。

（3）基因的首段必須含有使其僅能在牛的乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的啟動(dòng)子，才能驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。轉(zhuǎn)基因牛是否培育成功，可以通過(guò)抗原-抗體雜交技術(shù)從分子水平進(jìn)行檢測(cè)。

（4）科研人員利用經(jīng)EBO免疫后小鼠的B淋巴（效應(yīng)B或漿）細(xì)胞與鼠的瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交，篩選后進(jìn)一歩培養(yǎng)的是雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外快速增殖。單克隆抗體具備的特點(diǎn)特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可能大量制備。