Question

【題目】環(huán)磷酰胺（CP)是常用的化療藥物，研究表明CP對遺傳物質(zhì)具有損傷效應(yīng)，可導(dǎo)致染色體結(jié)構(gòu)變異產(chǎn)生微核�，F(xiàn)欲以微核率（含微核的細(xì)胞數(shù)占觀察細(xì)胞總數(shù)的比例）為檢測指標(biāo)，探究輪葉黨參醇提取物水溶部分（WACL)的濃度和給藥順序?qū)?/span>CP所致突變的拮抗作用，請根據(jù)以下提供的實驗材料，提出實驗思路并進(jìn)行分析。

材料與用具：大鼠外周血淋巴細(xì)胞懸液，動物細(xì)胞培養(yǎng)液，濃度為4mg/mL的WACL溶液，20μg/mL的CP溶液，生理鹽水，培養(yǎng)瓶若干個，顯微鏡，血細(xì)胞計數(shù)板等。[要求與說明：微核是喪失著絲粒的染色體斷片于末期之后單獨(dú)形成的一個或幾個規(guī)則的次核（如圖）；染色和制作裝片的具體方法不作要求；實驗條件適宜。]

請回答：

(1)實驗思路（其中實驗分組用表格形式表示)

①

②

③

(2)分析與討論

①異常細(xì)胞的細(xì)胞周期中，觀察計數(shù)微核的最佳時期應(yīng)是_________。

②若本實驗所得結(jié)果如下圖所示。

據(jù)此可以得出的結(jié)論是：a.________； b._________。

Answer 1

【答案】 ①利用濃度為4mg/mL的WACL溶液配置成0.25mg/mL、1mg/mL的溶液。

②取11個培養(yǎng)瓶，并編號，并在瓶中加入等量且適量的大鼠外周血淋巴細(xì)胞懸液和培養(yǎng)液。

③實驗分組；濃度和加藥順序表中位置可合理互換；只寫前三行，另附加語言“另設(shè)只加生理鹽水、CP對照組”也得分

表：給藥順序和WACL對CP所致突變拮抗作用的實驗分組

④按上述分組，在各培養(yǎng)瓶中加入等量的相關(guān)溶液，培養(yǎng)一段時間。

⑤取各培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液，在顯微鏡下統(tǒng)計微核細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞總數(shù)，記錄結(jié)果并計算微核率。 間期 a.不同濃度的WACL均對CP所致突變有拮抗作用

b.中低濃度先加WACL的效果好于其他兩種加藥順序

【解析】試題分析：依據(jù)實驗遵循的單一變量原則，由題意和反映實驗結(jié)果的柱形圖所呈現(xiàn)的信息確定實驗?zāi)康模�找出實驗變量（自變量、因變量、無關(guān)變量），在此基礎(chǔ)上來對實驗組和對照組進(jìn)行設(shè)置，進(jìn)而進(jìn)行相關(guān)問題的解答。

(1)依題意可知：本實驗?zāi)康氖?/span>探究輪葉黨參醇提取物水溶部分（WACL)的濃度和給藥順序?qū)�CP所致突變的拮抗作用，因此自變量是黨參醇提取物水溶部分（WACL)的濃度和給藥順序，因變量是觀察統(tǒng)計含微核的細(xì)胞數(shù)占觀察細(xì)胞總數(shù)的比例，即微核率。其它對實驗結(jié)果有影響的無關(guān)變量應(yīng)控制相同且適宜。分析柱形圖所呈現(xiàn)的信息，根據(jù)實驗設(shè)計遵循的對照原則，可知：（一）在探究輪葉黨參醇提取物水溶部分(WACL)對環(huán)磷酰胺(CP)所致突變的拮抗作用時，需設(shè)置WACL濃度為0.25mg/mL、1mg/mL、 4mg/mL的三個實驗組，以及只加生理鹽水和只加CP的對照組。（二）為探究給藥順序?qū)�實驗結(jié)果的影響，在相同的CP濃度、相同的WACL濃度下，又需設(shè)置給藥順序為：①先加CP、后加WACL，②先加WACL、后加CP，③同時加入WACL和CP的三組。綜合（一）和（二），共需取11個培養(yǎng)瓶用來體外培養(yǎng)大鼠外周血淋巴細(xì)胞。詳細(xì)的實驗步驟如下：

①利用濃度為4mg/mL的WACL溶液配置成0.25mg/mL、1mg/mL的溶液。

②取11個培養(yǎng)瓶，并編號，并在瓶中加入等量且適量的大鼠外周血淋巴細(xì)胞懸液和培養(yǎng)液。

③實驗分組：給藥順序和WACL對CP所致突變拮抗作用的實驗分組如下表：

④按上述分組，在各培養(yǎng)瓶中加入等量的相關(guān)溶液，培養(yǎng)一段時間。

⑤取各培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液，在顯微鏡下統(tǒng)計微核細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞總數(shù)，記錄結(jié)果并計算微核率。 (2) ①由題意“微核是喪失著絲粒的染色體斷片于末期之后單獨(dú)形成的一個或幾個規(guī)則的次核”可知：異常細(xì)胞的細(xì)胞周期中，觀察計數(shù)微核的最佳時期應(yīng)是間期。

②分析柱形圖呈現(xiàn)的信息可知，本實驗可以得出的結(jié)論是： a.不同濃度的WACL均對CP所致突變有拮抗作用；b.中低濃度先加WACL的效果好于其他兩種加藥順序。