Question

【題目】木糖醇可作為甜味劑，還具有抗齲齒的特性。常被用來作為食品甜味劑或醫(yī)療上給糖尿病患者作糖的替代品。用微生物生產(chǎn)木糖醇副產(chǎn)物少且含量低，易于分離提純。為了篩選木糖醇高產(chǎn)菌株，某研究小組設(shè)計(jì)了下表所示的培養(yǎng)基。請(qǐng)分析回答：

營(yíng)養(yǎng) 物質(zhì)	木糖	蛋白胨	酵母膏	MgS04 7H2O	CaCl2 2H2O	KH2PO4	(NH4)2SO4	水
含量(g)	20	20	0.5	0.2	0.1	2	5	定容至1000 mL

（1）按照物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基為______________培養(yǎng)基。若要利用該培養(yǎng)基獲得木糖醇高產(chǎn)菌株的菌落，則應(yīng)添加的成分是_____________。該培養(yǎng)基中主要的碳源和氮源分別是_____________。

（2）為了防止雜菌污染，該培養(yǎng)基溶化后要進(jìn)行_________，常用的方法是__________。

（3）實(shí)驗(yàn)菌種通常從木糖廠廢水、廢棄的木糖液污泥中采集，說明木糖醇高產(chǎn)菌株主要生活在______________的環(huán)境中。

（4）為了快速獲得木糖醇高產(chǎn)菌株，通常采用搖床培養(yǎng)的方法，由此說明木糖醇高產(chǎn)菌株的異化作用類型為__________，此外，搖床培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)還有________________。

（5）若要檢測(cè)培養(yǎng)液中菌體的數(shù)量，通常將菌液用__________接種到固體平板培養(yǎng)基表面，根據(jù)___________估算菌液中菌體的數(shù)量。

Answer 1

【答案】液體 瓊脂（凝固劑） 木糖、蛋白胨 滅菌 高壓蒸汽滅菌法 富含木糖 需氧型 使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，充分利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 稀釋涂布平板法 菌落數(shù)

【解析】

微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）按照物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。若要利用該培養(yǎng)基獲得木糖醇高產(chǎn)菌株的菌落，則應(yīng)添加的成分是瓊脂（凝固劑）。該培養(yǎng)基中主要的碳源和氮源分別是木糖、蛋白胨。

（2）微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌。實(shí)驗(yàn)中配制好的培養(yǎng)基滅菌通常使用高壓蒸汽滅菌法滅菌。

（3）實(shí)驗(yàn)菌種通常從木糖廠廢水、廢棄的木糖液污泥中采集，說明木糖醇高產(chǎn)菌株主要生活在富含木糖的環(huán)境中。

（4）搖床培養(yǎng)將錐形瓶放在搖床上振蕩，能增加培養(yǎng)液中的溶氧量，快速獲得木糖醇高產(chǎn)菌株，由此說明木糖醇高產(chǎn)菌株的異化作用類型為需氧型，此外，搖床培養(yǎng)使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

（5）若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)。采用稀釋涂布平板法將一定量的菌液接種到固體培養(yǎng)基上，統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)量來代表菌體數(shù)。