Question

【題目】科學(xué)家把編碼霍亂毒素的無毒性β鏈基因轉(zhuǎn)移到苜蓿細(xì)胞后培育出轉(zhuǎn)基因苜蓿。其具體過程如下：

（1）構(gòu)建重組DNA分子常用的工具酶是____________和____________。

（2）圖中過程②采用的方法是____________，Ti質(zhì)粒的T—DNA上有一個tms片段能促進生長素的大量合成，在對Ti質(zhì)粒改造時____________（填“應(yīng)該”或“不應(yīng)該”）將該片段去除。

（3）該實驗中將農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入苜蓿細(xì)胞的原生質(zhì)體后，需再生細(xì)胞壁。請從理論上提出兩種實驗室檢測原生質(zhì)體是否再生出細(xì)胞壁的方法：①________________________；②________________________。

（4）把含有目的基因的苜蓿細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時，細(xì)胞先后經(jīng)過__________、__________兩個重要階段。

Answer 1

【答案】 限制酶 DNA連接酶 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 應(yīng)該 將細(xì)胞置于高滲溶液中，用顯微鏡觀察是否發(fā)生質(zhì)壁分離 將細(xì)胞置于清水中，用顯微鏡觀察是否破碎 脫分化 再分化

【解析】試題分析：本題考查基因工程、細(xì)胞工程、質(zhì)壁分離實驗，考查對基因工程操作步驟、組織培養(yǎng)過程、質(zhì)壁分離實驗的理解和應(yīng)用。解答此題，可根據(jù)質(zhì)壁分離的原理檢測原生質(zhì)體是否再生出細(xì)胞壁。

（1）構(gòu)建重組DNA分子需要用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，并用DNA連接酶進行鏈接。

（2）圖中過程②采用的方法是培育轉(zhuǎn)基因植物常用的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，在對Ti質(zhì)粒改造時應(yīng)該將T—DNA上促進生長素大量合成的tms片段去除，避免T—DNA進入受體細(xì)胞后引起細(xì)胞快速分裂和生長，形成腫瘤。

（3）細(xì)胞壁對植物細(xì)胞具有支持和保護作用，檢測原生質(zhì)體是否再生出細(xì)胞壁，一種方法是將細(xì)胞置于高滲溶液中，用顯微鏡觀察細(xì)胞是否因失水導(dǎo)致質(zhì)壁分離，另一種方法是將細(xì)胞置于清水中，用顯微鏡觀察細(xì)胞是否因大量吸水而漲破。

（4）含有目的基因的苜蓿細(xì)胞在組織培養(yǎng)過程中先后經(jīng)過脫分化和再分化兩個階段，最后發(fā)育為幼苗。