(15分)基因敲除是應(yīng)用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)!盎蚯贸(xì)胞”構(gòu)建過程如下:
第一步:從小鼠囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞(ES),在培養(yǎng)基中擴(kuò)增。這些細(xì)胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。
第二步:構(gòu)建基因表達(dá)載體。取與靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對(duì),所以能像“準(zhǔn)星”一樣,將表達(dá)載體準(zhǔn)確地帶到靶基因的位置。
第三步:將表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞,并與其內(nèi)靶基因同源重組,完成胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步:基因改造后的胚胎干細(xì)胞增殖、篩選。
請(qǐng)根據(jù)上述資料,回答下列問題:
(1)在把與靶基因序列同源的目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前,應(yīng)首先完成 。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則選擇的受體細(xì)胞通常是 ;若用大腸桿菌儲(chǔ)存目的基因,則需先將其處理為 細(xì)胞。
(3)上述資料中neoR基因的作用最可能是 。
(4)獲得的小鼠,通過有性生殖產(chǎn)生的后代是否都含該目的基因 。
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科目:高中生物 來源:2010~2011學(xué)年吉林省吉林一中高二下學(xué)期第一次月考生物試卷 題型:綜合題
基因敲除是應(yīng)用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)。通常意義上的基因敲除主要是應(yīng)用DNA重組原理,用設(shè)計(jì)好的DNA片段替代動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)的基因片段,從而達(dá)到基因敲除的目的。在后基因組時(shí)代,研究的重點(diǎn)是利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或基因敲除的動(dòng)物研究基因的功能,運(yùn)用基因重組進(jìn)行基因敲除依然是構(gòu)建基因敲除動(dòng)物模型中最普遍的使用方法,其基本原理如下圖所示。請(qǐng)回答下列問題:
(1)在把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前,應(yīng)選擇一個(gè)合適的 與之結(jié)合,在這一過程中所需要的工具酶是限制性內(nèi)切酶和 。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則一般是通過病毒感染或顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,選擇的受體細(xì)胞應(yīng)該是 。
(3)在此類基因操作中,通?梢杂盟傅陌l(fā)光蛋白作為標(biāo)記物。水母發(fā)光蛋白有發(fā)光環(huán),能在一定條件下發(fā)出熒光,現(xiàn)已將這種蛋白質(zhì)的基因作為生物轉(zhuǎn)基因的標(biāo)記,在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中,這種蛋白質(zhì)的作用是( )
A.促使目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中 | B.促使目的基因在寄主細(xì)胞中復(fù)制 |
C.使目的基因的轉(zhuǎn)移容易被檢測(cè)出來 | D.使目的基因容易表達(dá)成功 |
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科目:高中生物 來源:湖南省2009—2010學(xué)年下學(xué)期高二學(xué)業(yè)水平模擬考試(理綜)生物部分 題型:綜合題
(15分)基因敲除是應(yīng)用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)!盎蚯贸(xì)胞”構(gòu)建過程如下:
第一步:從小鼠囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞(ES),在培養(yǎng)基中擴(kuò)增。這些細(xì)胞中需要改造的基因稱為“靶基因”。
第二步:構(gòu)建基因表達(dá)載體。取與靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入neoR(新霉素抵抗基因)等。由于同源臂與靶基因的DNA正好配對(duì),所以能像“準(zhǔn)星”一樣, 將表達(dá)載體準(zhǔn)確地帶到靶基因的位置。
第三步:將表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞,并與其內(nèi)靶基因同源重組,完成胚胎干細(xì)胞的基因改造。
第四步:基因改造后的胚胎干細(xì)胞增殖、篩選。
請(qǐng)根據(jù)上述資料,回答下列問題:
(1)在把與靶基因序列同源的目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前,應(yīng)首先完成 。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則選擇的受體細(xì)胞通常是 ;若用大腸桿菌儲(chǔ)存目的基因,則需先將其處理為 細(xì)胞。
(3)上述資料中neoR基因的作用最可能是 。
(4)獲得的小鼠,通過有性生殖產(chǎn)生的后代是否都含該目的基因 。
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科目:高中生物 來源:2010~2011學(xué)年湖北省高二下學(xué)期期中考試生物試卷 題型:綜合題
基因敲除是應(yīng)用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)。通常意義上的基因敲除主要是應(yīng)用DNA重組原理,用設(shè)計(jì)好的DNA片段替代動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)的基因片段,從而達(dá)到基因敲除的目的。在后基因組時(shí)代,研究的重點(diǎn)是利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或基因敲除的動(dòng)物研究基因的功能,運(yùn)用基因重組進(jìn)行基因敲除依然是構(gòu)建基因敲除動(dòng)物模型中最普遍的使用方法,其基本原理如下圖所示。請(qǐng)回答下列問題:
(1)在把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前,應(yīng)選擇一個(gè)合適的 與之結(jié)合,在這一過程中所需要的工具酶是限制性內(nèi)切酶和 。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則一般是通過病毒感染或顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,選擇的受體細(xì)胞應(yīng)該是 。
(3)在此類基因操作中,通常可以用水母的發(fā)光蛋白作為標(biāo)記物。水母發(fā)光蛋白有發(fā)光環(huán),能在一定條件下發(fā)出熒光,現(xiàn)已將這種蛋白質(zhì)的基因作為生物轉(zhuǎn)基因的標(biāo)記,在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中,這種蛋白質(zhì)的作用是( )
A.促使目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中 B.促使目的基因在寄主細(xì)胞中復(fù)制
C.使目的基因的轉(zhuǎn)移容易被檢測(cè)出來 D.使目的基因容易表達(dá)成功
(4)按上述操作獲得的轉(zhuǎn)基因小鼠是雜合子,如果想獲得一個(gè)目的基因純合的個(gè)體,以研究該種動(dòng)物體內(nèi)靶基因的功能,應(yīng)該如何進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)?
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科目:高中生物 來源:2010~2011學(xué)年吉林省高二下學(xué)期第一次月考生物試卷 題型:綜合題
基因敲除是應(yīng)用DNA重組原理發(fā)展起來的一門新興技術(shù)。通常意義上的基因敲除主要是應(yīng)用DNA重組原理,用設(shè)計(jì)好的DNA片段替代動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)的基因片段,從而達(dá)到基因敲除的目的。在后基因組時(shí)代,研究的重點(diǎn)是利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或基因敲除的動(dòng)物研究基因的功能,運(yùn)用基因重組進(jìn)行基因敲除依然是構(gòu)建基因敲除動(dòng)物模型中最普遍的使用方法,其基本原理如下圖所示。請(qǐng)回答下列問題:
(1)在把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞前,應(yīng)選擇一個(gè)合適的 與之結(jié)合,在這一過程中所需要的工具酶是限制性內(nèi)切酶和 。
(2)如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則一般是通過病毒感染或顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,選擇的受體細(xì)胞應(yīng)該是 。
(3)在此類基因操作中,通?梢杂盟傅陌l(fā)光蛋白作為標(biāo)記物。水母發(fā)光蛋白有發(fā)光環(huán),能在一定條件下發(fā)出熒光,現(xiàn)已將這種蛋白質(zhì)的基因作為生物轉(zhuǎn)基因的標(biāo)記,在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中,這種蛋白質(zhì)的作用是( )
A.促使目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞中 B.促使目的基因在寄主細(xì)胞中復(fù)制
C.使目的基因的轉(zhuǎn)移容易被檢測(cè)出來 D.使目的基因容易表達(dá)成功
(4)按上述操作獲得的轉(zhuǎn)基因小鼠是雜合子,如果想獲得一個(gè)目的基因純合的個(gè)體,以研究該種動(dòng)物體內(nèi)靶基因的功能,應(yīng)該如何進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)?
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