Question

（10分）尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類、數(shù)量繁多，同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌）。培養(yǎng)基成分如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。

請分析回答問題：

KH2PO4	1.4 g
Na2HPO4	2.1 g
MgSO4·7H2O	0.2 g
葡萄糖	10.0 g
尿素	1.0 g
瓊脂	15.0 g
將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL

 

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 

（2）“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的________和________，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是__________________。

（3）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用________的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。

（4）下列材料或用具中：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管；③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。需要滅菌的是________；需要消毒的是________。（填序號）

（5）在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有________（填序號）。

①由于土樣不同 �、谟捎谂囵B(yǎng)基污染  ③由于操作失誤�、軟]有設(shè)置對照

（6）簡述土壤中可分解尿素細(xì)菌的鑒定方法及原理： _____________。

 

Answer 1

【答案】

 (1) 目的菌　 選擇    (2) 尿素　 葡萄糖　  為目的菌提供氧氣

(3) 涂布平板(劃線)    (4) ①和② �、邸� (5) ①②③

(6)在以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH增高，使酚紅指示劑變紅

【解析】（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選分解尿素的細(xì)菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）氮源是尿素，碳源是葡萄糖，實(shí)驗(yàn)振蕩的目的是為目的菌提供氧氣。

（3）固體培養(yǎng)基上接種的方法常用涂布平板劃線法。

（4）微生物培養(yǎng)過程中需要滅菌的有培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管，需要消毒的有實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。

（5）A同學(xué)篩選出的菌落數(shù)與其他同學(xué)不同，數(shù)量較多，可能是土樣不同、培養(yǎng)基污染、操作失誤等。

（6）鑒定分解尿素的細(xì)菌的方法及原理是在以尿素為惟一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解為氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH增高，使酚紅指示劑變紅。