Question

（8分，每空1分）熒火蟲(chóng)體內(nèi)的熒光素酶催化的系列反應(yīng)導(dǎo)致熒火蟲(chóng)發(fā)光。如果熒光素酶存在于植物體內(nèi)，也可以使植物體發(fā)光。一直以來(lái)熒光素酶的唯一來(lái)源是從熒火蟲(chóng)腹部提取。但科學(xué)家成功地通過(guò)基因工程將熒光素酶基因?qū)�入到大腸桿菌體內(nèi)，使其產(chǎn)生熒光素酶。 請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：

（1）在此基因工程中，目的基因是                      ，獲得目的基因的常用方法有：                         、人工合成和PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。

（2）將此目的基因?qū)�入受體細(xì)胞內(nèi)需要載體的幫助。下列各項(xiàng)在選取載體時(shí)不必考慮的        是                        。（用字母表示）

A．能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存  

B．具1至多個(gè)限制酶的切點(diǎn)

C．具有與目的基因相同的堿基片段

D．具有某些標(biāo)記基因

（3）在基因表達(dá)載體構(gòu)建的過(guò)程中，需要               、              等多種酶的參與。載體中啟動(dòng)子的化學(xué)本質(zhì)是             。

（4）在此基因工程中受體細(xì)胞為                     。

（5）為檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可利用放射性同位素標(biāo)記的             作探針與基因組DNA雜交。

Answer 1

（共8分，每空1分）

（1）熒光素酶基因  直接提取法

（2）C

（3）限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）   DNA連接酶   DNA片段

（4）大腸桿菌

（5）目的基因

解析:

考查的是基因工程的基本內(nèi)容。

（1）從題目所給信息可知，科學(xué)家是將螢火蟲(chóng)的熒光素酶基因?qū)�入到了大腸桿菌體內(nèi)，所以目的基因是熒光素酶基因，獲得目的基因的方法常用的有直接提取法，人工合成和PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。

（2）作為運(yùn)載體，必須要滿(mǎn)足三個(gè)條件：能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存；具多個(gè)限制酶的切點(diǎn)，以便與目的基因結(jié)合；具有某些標(biāo)記基因，以便進(jìn)行篩選。所以不必要考慮的是C。

（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要用限制酶切割目的基因和運(yùn)載體，然后用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接起來(lái)，常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒，為小型的環(huán)狀的DNA分子，所以載體中的啟動(dòng)子的化學(xué)本質(zhì)就是DNA片段。

（4）在此基因工程中，科學(xué)家是將目的基因?qū)�入到了大腸桿菌體內(nèi)，所以受體細(xì)胞就是大腸桿菌。

（5）為了檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入到了受體細(xì)胞，可利用放射性同位素標(biāo)記的目的基因作為探針與基因組的DNA雜交，如果能夠雜交成功，說(shuō)明目的基因已經(jīng)導(dǎo)入到了受體細(xì)胞。