Question

【題目】下表為某培養(yǎng)基的配方：

成分	牛肉膏	葡萄糖	K2HPO4	伊紅	美藍(lán)	瓊脂	蒸餾水
含量	10g	10g	2g	0.4g	0.065g	適量	1000mL

（1）以上培養(yǎng)基配方可以用于鑒別自來水中的______，菌落呈_____色。

（2）若此培養(yǎng)基含有青霉素，可用于篩選含_________的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。

（3）根據(jù)培養(yǎng)皿上菌落的平均數(shù)可以計算自來水中大腸桿菌的密度，原因是___________________________________________________。

（4）在5個培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的自來水樣品溶液0．1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為18、153、462、164和184。該過程采取的接種方法是過濾自來水后的濾膜放在此培養(yǎng)基上，此方法叫做_______，每升自來水中大腸桿菌的數(shù)量為________個；與血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)法相比，此計數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較小，原因是___________________________________。

（5）統(tǒng)計菌落數(shù)目時，一定要選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄數(shù)據(jù)作為結(jié)果，可以防止__________________________________________________。

Answer 1

【答案】大腸桿菌 黑 青霉素抗性基因（或抗青霉素基因） 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌 濾膜法 1．67×1011 血細(xì)胞計數(shù)法統(tǒng)計的是總菌數(shù)，而濾膜法統(tǒng)計時，當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起，平板上觀察到的只是一個菌落，故用濾膜法測得的菌落數(shù)偏低 培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致計數(shù)時遺漏部分菌落

【解析】

根據(jù)表格分析，該培養(yǎng)基的成分中牛肉膏可以提供碳源和氮源，葡萄糖可以提供碳源，磷酸氫二鉀為無機(jī)鹽；該培養(yǎng)基含有凝固劑瓊脂，說明為固體培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基含有伊紅、美藍(lán)，可以用于鑒別大腸桿菌。

（1）伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基可用于鑒別自來水中的大腸桿菌，菌落呈黑色。

（2）若此培養(yǎng)基含有青霉素，則其可用于篩選含青霉素抗性基因的大腸桿菌。

（3）由于當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，所以根據(jù)培養(yǎng)皿上菌落的平均數(shù)可以計算自來水中大腸桿菌的密度。

（4）根據(jù)題意分析，該過程采取的接種方法是過濾自來水后的濾膜放在此培養(yǎng)基上，為濾膜法。統(tǒng)計的菌落數(shù)應(yīng)介于30～300之間，故選擇細(xì)菌菌落數(shù)為 153、164 和184的平板計數(shù)，每克該土壤樣品中的菌落數(shù)對應(yīng)的應(yīng)該是每毫升菌液中的細(xì)菌數(shù)目，所以每升該土壤樣品中的菌落數(shù)為(153+164+184)÷3÷0.1×105×103=1.67×1011。使用濾膜法計數(shù)時，當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，而血細(xì)胞計數(shù)法計數(shù)統(tǒng)計的總菌數(shù)，包括活菌和死菌，所以用濾膜法計數(shù)測得的細(xì)菌數(shù)較少。

（5）統(tǒng)計菌落數(shù)目時，一定要選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄數(shù)據(jù)作為結(jié)果，可以防止因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致計數(shù)時遺漏部分菌落。