Question

【題目】回答下列(一)、(二)小題：

（一）回答與生物技術(shù)在食品加工中應(yīng)用有關(guān)的問題：

（1）制作蘋果醋的具體流程如圖所示：

①圖中乙過程可加入適量的果膠酶和果膠甲酯酶；為鑒定獲得的果汁是否含有果膠，可加入適量的________________。丙過程為適宜條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵，發(fā)酵完成的標(biāo)志是________________。

②若用于醋酸發(fā)酵的醋桿菌被雜菌污染，欲消除污染的雜菌，可通過劃線分離法獲得________________，然后進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，常用的培養(yǎng)基是_________。

A．MS培養(yǎng)基 B．LB平面培養(yǎng)基

C．添加蔗糖的豆芽汁 D．含蛋白胨、酵母提取物、甘露醇的培養(yǎng)液

（2）發(fā)酵制作泡菜時(shí)，利用的微生物是從________________（天然/人工培養(yǎng)）中獲得；在發(fā)酵過程中微生物利用菜中的________________進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生有機(jī)酸和醇類物質(zhì)等，同時(shí)還會(huì)產(chǎn)生一定量的亞硝酸�？梢杂霉怆姳壬�法定量測定亞硝酸鹽，在對樣品處理過程中加入硫酸鋅和氫氧化鈉溶液的作用是________________；進(jìn)行樣品測定時(shí)，用光程為1cm的比色杯在550nm處測定OD值，若測定的OD值偏大可采取的措施是________________。

（二）回答與抗蟲棉培育有關(guān)的問題：

（1）土壤農(nóng)桿菌中的野生Ti質(zhì)粒能誘導(dǎo)腫瘤形成，但分子量太大，且缺乏可利用的單一________________酶位點(diǎn)，所以需對野生型Ti質(zhì)粒進(jìn)行改造。改造過程除了要切除致瘤基因外，還必須保留一段控制質(zhì)粒DNA________________的基因。同時(shí)還要將抗蟲基因轉(zhuǎn)入到質(zhì)粒的T-DNA區(qū)，獲得含目的基因的重組Ti質(zhì)粒。下列關(guān)于改造過程的敘述錯(cuò)誤的是________________

A．去除T-DNA區(qū)的激素基因，因?yàn)榧に鼗�因產(chǎn)物會(huì)導(dǎo)致植物轉(zhuǎn)化細(xì)胞內(nèi)激素不平衡而無限分裂，阻止正常植株的再生

B．在去除的激素基因的T-DNA區(qū)增加至少一個(gè)可以在植物體內(nèi)表達(dá)的標(biāo)記基因，這樣便于轉(zhuǎn)化細(xì)胞易于被檢測出來

C．在T-DNA區(qū)添加一個(gè)可以克隆外源目的基因的多聚接口，便于目的基因的克隆。

D．改造后含目的基因的重組Ti質(zhì)�？梢酝ㄟ^土壤農(nóng)桿菌胞內(nèi)寄生而進(jìn)入植物細(xì)胞，從而Ti質(zhì)粒整個(gè)整合到植物遺傳物質(zhì)中

（2）含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細(xì)胞：人為地在植株上造成創(chuàng)傷，然后把含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌接種在創(chuàng)傷面上，使農(nóng)桿菌在植物體內(nèi)進(jìn)行侵染實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化的目的。為了獲得較高的轉(zhuǎn)化率，一般采用無菌種子的實(shí)生苗或者試管苗。農(nóng)桿菌接種后，受傷部位一般________________（會(huì)、不會(huì)）出現(xiàn)腫瘤。在篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞時(shí)，可將感染部位的薄壁組織切下放入選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選和愈傷組織的誘導(dǎo)。最后將轉(zhuǎn)化的愈傷組織轉(zhuǎn)移至________________培養(yǎng)基上誘導(dǎo)叢狀苗，再生根誘導(dǎo)出再生植株。

（3）抗蟲棉植物的檢測：可對成體植株進(jìn)行________________實(shí)驗(yàn)檢測。

（4）多途徑的植物克�。和ㄟ^植物組織培養(yǎng)可以培養(yǎng)大量的試管苗，擴(kuò)大抗蟲棉的種植面積；通過大量培養(yǎng)特定的________________，實(shí)現(xiàn)了能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物（如抗蟲蛋白）的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)；通過________________，進(jìn)行單倍體克隆等。

Answer 1

【答案】乙醇 發(fā)酵瓶中停止產(chǎn)生氣泡 單菌落 D 天然 糖和其他營養(yǎng)物質(zhì) 沉淀析出蛋白質(zhì)等雜質(zhì) 對樣品溶液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?/span> 限制性核酸內(nèi)切 轉(zhuǎn)移 D 不會(huì) 生芽（或發(fā)芽） 棉鈴蟲感染 細(xì)胞系 花藥（花粉）培養(yǎng)

【解析】

1、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，條件是30～35℃、一直需氧；果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰�，再將乙醛變�(yōu)榇姿帷?/span>

2、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗�。泡菜中的亞硝酸鹽含量可以用比色法測定，即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽，重氮鹽與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

3、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，④目的基因的檢測與鑒定。

（一）（1）①為了鑒定獲得的果汁是否含有果膠，可加入適量的乙醇；酒精發(fā)酵利用的是酵母菌的無氧呼吸，完成的標(biāo)志是發(fā)酵瓶中停止產(chǎn)生氣泡。

②若用于醋酸發(fā)酵的醋桿菌被雜菌污染，欲消除污染的雜菌，可通過劃線分離法獲得單菌落；醋酸菌是一種細(xì)菌，其發(fā)酵可以產(chǎn)生醋酸，對其進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，應(yīng)該用含蛋白胨、酵母提取物、甘露醇的培養(yǎng)液，故選D。

（2）發(fā)酵制作泡菜時(shí)，利用的菌種是天然獲得的；發(fā)酵過程中微生物利用菜中的糖和其他營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生有機(jī)酸和醇類物質(zhì)等，同時(shí)還會(huì)產(chǎn)生一定量的亞硝酸；在利用光電比色法定量測定亞硝酸鹽時(shí)，對樣品處理過程中加入硫酸鋅和氫氧化鈉溶液的目的是沉淀析出蛋白質(zhì)等雜質(zhì)；進(jìn)行樣品測定時(shí)，用光程為1cm的比色杯在550nm處測定OD值，若測定的OD值偏大，可以對樣品溶液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尅?/span>

（二）（1）土壤農(nóng)桿菌中的野生Ti質(zhì)粒能誘導(dǎo)腫瘤形成，但分子量太大，且缺乏可利用的單一限制性核酸內(nèi)切酶位點(diǎn)，所以需對野生型Ti質(zhì)粒進(jìn)行改造；改造過程中要切除致瘤基因，保留一段控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的基因。

A、由于激素基因產(chǎn)物會(huì)導(dǎo)致植物轉(zhuǎn)化細(xì)胞內(nèi)激素不平衡而無限分裂，阻止正常植株的再生，所以改造過程中應(yīng)該去除T-DNA區(qū)的激素基因，A正確；

B、為了檢測出轉(zhuǎn)化細(xì)胞，應(yīng)該在去除的激素基因的T-DNA區(qū)增加至少一個(gè)可以在植物體內(nèi)表達(dá)的標(biāo)記基因，B正確；

C、應(yīng)該在T-DNA區(qū)添加一個(gè)可以克隆外源目的基因的多聚接口，便于目的基因的克隆，C正確；

D、改造后含目的基因的重組Ti質(zhì)�？梢酝ㄟ^土壤農(nóng)桿菌胞內(nèi)寄生而進(jìn)入植物細(xì)胞，但是Ti質(zhì)粒不會(huì)整個(gè)整合到植物遺傳物質(zhì)中，D錯(cuò)誤。

故選D。

（2）由于致瘤基因已經(jīng)被切除，因此農(nóng)桿菌接種后，受傷部位一般不會(huì)出現(xiàn)腫瘤；將轉(zhuǎn)化的愈傷組織轉(zhuǎn)移至生芽培養(yǎng)基上誘導(dǎo)叢狀苗，再生根誘導(dǎo)出再生植株。

（3）對成體植株進(jìn)行棉鈴蟲感染實(shí)驗(yàn)，可以對轉(zhuǎn)基因抗蟲棉進(jìn)行個(gè)體水平的檢測。

（4）通過大量培養(yǎng)特定的細(xì)胞系，實(shí)現(xiàn)了能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物（如抗蟲蛋白）的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)；通過花藥（花粉）培養(yǎng)，進(jìn)行單倍體克隆等。