Question

10．圖為雞血細(xì)胞中DNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的部分操作示意圖，請(qǐng)據(jù)圖分析，回答下列問(wèn)題：

（1）圖中正確的實(shí)驗(yàn)操作順序是③→②→⑤→④→①（用序號(hào)與箭頭表示）．
（2）步驟③中加入蒸餾水的目的是加速血細(xì)胞的破裂；步驟⑤中加入蒸餾水后DNA析出，該操作的原理是DNA在NaCl溶液中的溶解度，隨NaCl溶液濃度的降低而減�。�
（3）步驟①中所用酒精最佳是經(jīng)過(guò)充分預(yù)冷后再使用，該步驟的目的是提取含雜質(zhì)較少（或較純凈）的DNA（利用DNA不溶于酒精的性質(zhì)，可除去細(xì)胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNA）．
（4）DNA可用二苯胺試劑鑒定，沸水浴后的顏色反應(yīng)為藍(lán)色．
（5）由于雞血較難找到，某學(xué)生試圖用人血代替，結(jié)果沒(méi)有成功，其原因最可能是人血含DNA太少（成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核）．

Answer 1

分析 DNA粗提取和鑒定的過(guò)程：
（1）實(shí)驗(yàn)材料的選取：凡是含有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對(duì)較高的生物組織，成功的可能性更大．
（2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液：
動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過(guò)濾后收集濾液即可．如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜．例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過(guò)濾后收集研磨液．
（3）去除濾液中的雜質(zhì)：
方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；
方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；
方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同．
（4）DNA的析出與鑒定
①將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分．
②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解．然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑．混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)．

解答 解：（1）由以上分析可知，圖中表示正確的實(shí)驗(yàn)操作順序是③→②→⑤→④→①．
（2）步驟③中加入蒸餾水的目的是加速血細(xì)胞的破裂；當(dāng)NaCl溶液濃度大于0.14mol/L時(shí)，DNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液濃度的降低而減小，因此步驟⑤中加入蒸餾水后DNA析出．
（3）步驟①中所用酒精最佳是經(jīng)過(guò)充分預(yù)冷后再使用，該步驟的目的是利用DNA不溶于酒精的性質(zhì)，可除去細(xì)胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNA．
（4）DNA可用二苯胺試劑鑒定，沸水浴后的顏色反應(yīng)為藍(lán)色．
（5）人是哺乳動(dòng)物，哺乳動(dòng)物血液中的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核和細(xì)胞器，因此用人血代替雞血來(lái)進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)難以取得成功．
故答案為：
（1）③→②→⑤→④→①
（2）加速血細(xì)胞的破裂    DNA在NaCl溶液中的溶解度，隨NaCl溶液濃度的降低而減小
（3）充分預(yù)冷    提取含雜質(zhì)較少（或較純凈）的DNA（利用DNA不溶于酒精的性質(zhì)，可除去細(xì)胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNA）
（4）二苯胺   藍(lán)色
（5）人血含DNA太少（成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核）

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查DNA的粗提取和鑒定，要求考生識(shí)記DNA粗提取和鑒定的原理、操作步驟、實(shí)驗(yàn)中采用的試劑及試劑的作用等，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．