（15分）自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱為熒光素酶。熒光素酶及其合成基因在生物研究中有著廣泛的利用。

（1）熒光素酶基因常被作為基因工程中的標(biāo)記基因，其作用是將 篩選出來(lái)。

（2）下表為4種限制酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)，右下圖為含有熒光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切點(diǎn)。若需利用酶切法（只用一種酶）獲得熒光素酶基因，最應(yīng)選擇的限制酶是 。

限制酶

Msp I

BamH I

Mbo I

Sma I

酶切位點(diǎn)

（3）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增熒光素酶基因是利用 的原理，使熒光素酶基因數(shù)量呈 方式增加。

（4）迄今為止，可將上述具有熒光素酶基因的運(yùn)載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞的技術(shù)，應(yīng)用最多的、最有效的是 。經(jīng)一系列步驟，將所獲得的胚胎早期培養(yǎng)一段時(shí)間后，再移植到雌性動(dòng)物的 或子宮內(nèi)，使其發(fā)育成為具有新性狀的動(dòng)物。

（5）囊胚階段的胚胎進(jìn)行胚胎分割，可以提高胚胎的利用率，但在進(jìn)行分割時(shí)應(yīng)注意 。

（6）熒光素酶在ATP的參與下，可使熒光素發(fā)出熒光。生物學(xué)研究中常利用“熒光素－熒光素酶發(fā)光法”來(lái)測(cè)定樣品中ATP的含量。某研究小組對(duì)“測(cè)定ATP時(shí)所需熒光素酶溶液的最佳濃度”進(jìn)行了探究。

【實(shí)驗(yàn)材料】1×10－8mol/LATP標(biāo)準(zhǔn)液、緩沖溶液、70mg/L熒光素溶液（過(guò)量）、濃度分別為10、20、30、40、50、60、70mg/L的熒光素酶溶液。

【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】見(jiàn)下圖。

【實(shí)驗(yàn)分析與結(jié)論】

①實(shí)驗(yàn)過(guò)程：為使結(jié)果更加科學(xué)準(zhǔn)確，應(yīng)增設(shè)一組 作為對(duì)照。除題目已涉及的之外，還需要嚴(yán)格控制的無(wú)關(guān)變量有 （至少寫(xiě)出一個(gè)）。

②實(shí)驗(yàn)結(jié)果：由圖C可知， 點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的熒光素酶濃度為最佳濃度。

（7）食品衛(wèi)生檢驗(yàn)中，可利用上述方法測(cè)定樣品中細(xì)菌的ATP總含量，進(jìn)而測(cè)算出細(xì)菌的數(shù)量，判斷食品污染程度。測(cè)算的前提是每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中ATP的含量 。

（15分，除注明外，每空1分）

（1）含有目的基因的受體細(xì)胞（2分） （2）MspⅠ（2分）

（3）DNA雙鏈復(fù)制 指數(shù) （4）顯微注射技術(shù) 輸卵管（2分）

（5）將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割（2分）

（6）①濃度為0 mg/L的熒光素酶溶液 溫度（或反應(yīng)時(shí)間等） ②d

（7）大致相同（且相對(duì)穩(wěn)定）

【解析】

試題分析：（1）在基因工程中，標(biāo)記基因的作用是將含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)。

（2）比較各種酶切位點(diǎn)可知，限制酶Sma I的酶切位點(diǎn)中包含有限制酶Msp I的酶切位點(diǎn)，而且限制酶Sma I和Msp I分別位于熒光素酶基因的兩側(cè)，若利用酶切法，并且只用一種酶，獲得熒光素酶基因，最應(yīng)選擇的限制酶是MspⅠ。

（3）PCR技術(shù)擴(kuò)增熒光素酶基因是利用了DNA雙鏈復(fù)制的原理，使熒光素酶基因數(shù)量呈指數(shù)方式增加。

（4）將具有熒光素酶基因的運(yùn)載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞（通常為受精卵），常采用顯微注射技術(shù)。正常情況下，受精過(guò)程發(fā)生雌性動(dòng)物的輸卵管內(nèi)，受精卵形成后即在輸卵管內(nèi)進(jìn)行有絲分裂、開(kāi)始發(fā)育，并且向子宮方向移動(dòng)，因此，可將基因工程中獲得的胚胎早期培養(yǎng)一段時(shí)間后，再移植到雌性動(dòng)物的輸卵管或子宮內(nèi)，使其發(fā)育成為具有新性狀的動(dòng)物。

（5）進(jìn)行胚胎分割時(shí)應(yīng)注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割。

（6）①依題意，該實(shí)驗(yàn)的目的是“測(cè)定ATP時(shí)所需熒光素酶溶液的最佳濃度”，自變量是不同的熒光素酶溶液的濃度，因變量可通過(guò)樣品中熒光素發(fā)出熒光的強(qiáng)弱來(lái)判斷ATP含量的多少，只有與不加熒光素酶溶液的一組對(duì)照，實(shí)驗(yàn)才更具有說(shuō)服力，所以應(yīng)增設(shè)一組濃度為0 mg/L的熒光素酶溶液作為對(duì)照。除了自變量外，凡是對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響的因素都屬于無(wú)關(guān)變量，如溫度、反應(yīng)時(shí)間、加入液體的量等等，需要嚴(yán)格控制。②坐標(biāo)圖顯示，熒光素酶濃度低于40 mg/L時(shí)，隨熒光素酶溶液濃度的增加，測(cè)試管中熒光強(qiáng)度逐漸增加，當(dāng)達(dá)到40 mg/L時(shí)，熒光強(qiáng)度不再隨熒光素酶溶液濃度的增加而增加，所以，d點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的熒光素酶濃度為最佳濃度。

（7）如果每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中ATP的含量大致相同（且相對(duì)穩(wěn)定），即可利用上述方法測(cè)定樣品中細(xì)菌的ATP總含量，進(jìn)而測(cè)算出細(xì)菌的數(shù)量，從而判斷食品污染程度。

考點(diǎn)：本題考查基因工程、胚胎工程、實(shí)驗(yàn)變量的控制及探究實(shí)驗(yàn)的程序的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系以及具有對(duì)一些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行初步探究的能力。

練習(xí)冊(cè)系列答案
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關(guān)于內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)機(jī)制的現(xiàn)代觀點(diǎn)是（ ）

A.神經(jīng)調(diào)節(jié) B.體液調(diào)節(jié)

C.神經(jīng)—體液—免疫調(diào)節(jié) D.神經(jīng)—體液調(diào)節(jié)

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科目：高中生物 來(lái)源：2014-2015學(xué)年山東省濰坊市高三上學(xué)期12月階段性教學(xué)質(zhì)檢生物卷（解析版） 題型：選擇題

細(xì)胞分裂是生物體一項(xiàng)重要的生命活動(dòng)，是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖和遺傳的基礎(chǔ)。據(jù)圖分析正確的是

A．圖①表示某植株體細(xì)胞分裂，下一時(shí)期的主要特點(diǎn)是DNA數(shù)目加倍

B．圖②表示某動(dòng)物睪丸內(nèi)的減數(shù)分裂，此細(xì)胞產(chǎn)生Aa精子的幾率是0

C．圖③是某高等雌性動(dòng)物體內(nèi)的一個(gè)細(xì)胞，一定代表的是卵細(xì)胞

D．圖②、③所示細(xì)胞的染色體行為分別對(duì)應(yīng)于圖④中的BC、DE段

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科目：高中生物 來(lái)源：2014-2015學(xué)年江西省新余市高三上學(xué)期期末考試?yán)砭C生物試卷（解析版） 題型：綜合題

毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡(jiǎn)單流程如圖。

(1)將KIFⅡ基因?qū)肽康幕虻募?xì)胞內(nèi)，獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊這種新性狀的產(chǎn)生所依據(jù)的原理是____________。從基因文庫(kù)中獲得的KIFⅡ基因可用_________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。過(guò)程①中最常用的運(yùn)載工具是 。

(2)在過(guò)程②中，用___________處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞。在培養(yǎng)過(guò)程中，將成纖維細(xì)胞置于_____________混合的氣體培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)液中加入__________達(dá)到無(wú)菌環(huán)境。

(3)在過(guò)程③中，用______________處理以獲取更多的卵（母）細(xì)胞,在體外培養(yǎng)到______________期通過(guò)顯微操作進(jìn)行去核處理。

(4)從重組細(xì)胞到早期胚胎過(guò)程中所用的胚胎工程技術(shù)是___________。在胚胎移植前，通過(guò)_________技術(shù)可獲得較多胚胎。

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科目：高中生物 來(lái)源：2014-2015學(xué)年江西省新余市高三上學(xué)期期末考試?yán)砭C生物試卷（解析版） 題型：選擇題

下圖表示人體的特異性免疫過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖判斷下列說(shuō)法正確的是（ ）

A．⑤⑥兩種免疫依次表示體液免疫和細(xì)胞免疫

B．能特異性識(shí)別抗原的細(xì)胞有a、b、c、d、f

C．抗原刺激后，細(xì)胞b和細(xì)胞c的細(xì)胞周期變長(zhǎng)

D．物質(zhì)④的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，可特異性清除抗原

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（10分）萌發(fā)的小麥種子中的淀粉酶主要有α－淀粉酶（在pH3.6以下迅速失活，但耐熱）、β－淀粉酶（不耐熱，70°C條件下15min后就失活，但耐酸）。以下是以萌發(fā)的小麥種子為原料來(lái)測(cè)定α－淀粉酶催化效率的實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答下列與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹繙y(cè)定40°C條件下α－淀粉酶的催化效率。

【實(shí)驗(yàn)材料】萌發(fā)3天的小麥種子。

【主要器材】麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)溶液、5%淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、恒溫水浴鍋、試管等。

【實(shí)驗(yàn)步驟】

（1）制備不同濃度麥芽糖溶液，與斐林試劑生成標(biāo)準(zhǔn)顏色。取7支潔凈試管編號(hào)，按下表中所示加入試劑，而后將試管置于60°C水浴中加熱2min，取出后按編號(hào)排序。

試劑

試管

1

2

3

4

5

6

7

麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)溶液（mL）

0

0.2

0.6

1.0

1.4

1.6

2.0

蒸餾水（mL）

X

1.8

Y

1.0

Z

0.4

0

斐林試劑（mL）

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

表中Z代表的數(shù)值是 。

（2）以萌發(fā)的小麥種子制取淀粉酶溶液，將裝有淀粉酶溶液的試管置于 ，取出后迅速冷卻，得到α－淀粉酶溶液。

（3）取A、B、C、D四組試管分別作以下處理：

試管

A1

A2

A3

B1

B2

B3

C

D

5%淀粉溶液（mL）

1

1

1

α－淀粉酶溶液（mL）

1

1

1

1

蒸餾水（mL）

1

40°C水浴鍋中保溫（min）

10

10

10

10

10

10

10

10

（4）將A1和B1試管中溶液加入到E1試管中，A2和B2溶液加入到E2試管中，A3和B3溶液加入到E3試管中，C、D試管中的溶液均加入到F試管中，立即將E1、E2、E3、F試管在40°C水浴鍋中保溫一段時(shí)間。然后分別加入2mL斐林試劑，并經(jīng)過(guò)60°C水浴中加熱2min后，觀察顏色變化。

【結(jié)果分析】將E1、E2、E3試管中的顏色與 試管進(jìn)行比較得出麥芽糖溶液濃度，并計(jì)算出α－淀粉酶催化效率的平均值。

【討論】①實(shí)驗(yàn)中F試管所起的具體作用是排除 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，從而對(duì)結(jié)果進(jìn)行校正。②若要測(cè)定β－淀粉酶的活性，則需要對(duì)步驟二進(jìn)行改變，具體的操作是將淀粉酶溶液 ，從而獲得β－淀粉酶。

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科目：高中生物 來(lái)源：2014-2015學(xué)年黑龍江省綏化市三校高三上期末聯(lián)考理科綜合生物試卷（解析版） 題型：綜合題

（15分）回答下列有關(guān)現(xiàn)代生物科技方面的問(wèn)題：

（1）構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí)，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生黏性末端，也可能產(chǎn)生________末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接，一般選擇能使二者產(chǎn)生___________(相同、不同)黏性末端的限制酶。

（2）在精卵結(jié)合過(guò)程中，防止多精入卵的第二道屏障稱做： 。

（3）生態(tài)經(jīng)濟(jì)：使一個(gè)系統(tǒng)產(chǎn)出的污染物，能夠成為本系統(tǒng)或另一個(gè)系統(tǒng)的生產(chǎn)原料，從而實(shí)現(xiàn)廢棄物的資源化�！盁o(wú)廢棄物農(nóng)業(yè)”體現(xiàn)了生態(tài)工程 原理。

（4）若要獲取轉(zhuǎn)基因植物人工種子，需培養(yǎng)到_______________階段，再進(jìn)行人工種皮的包裹；如用植物細(xì)胞實(shí)現(xiàn)目的基因所表達(dá)的蛋白質(zhì)類藥物的工廠化生產(chǎn)，培養(yǎng)到_______________階段即可。

（5）動(dòng)物克隆技術(shù)：目前動(dòng)物的克隆主要采用__________________技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)，我國(guó)禁止生殖性克隆，但不反對(duì)________________的研究。

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科目：高中生物 來(lái)源：2015屆上海市松江區(qū)高三上期末質(zhì)量監(jiān)控生命科學(xué)生物卷（解析版） 題型：綜合題

回答有關(guān)生命活動(dòng)調(diào)節(jié)的問(wèn)題。（12分）

Ⅰ Kisspeptin，簡(jiǎn)稱Kp，是Kp神經(jīng)元產(chǎn)生的一類多肽類激素，它通過(guò)調(diào)節(jié)生物體內(nèi)雌激素含量來(lái)調(diào)控生殖活動(dòng)。通常情況下，右圖中的過(guò)程①參與鵪鶉體內(nèi)雌激素含量的調(diào)節(jié)；排卵前期，啟動(dòng)過(guò)程②進(jìn)行調(diào)節(jié)。

（1）神經(jīng)元內(nèi)合成Kp的細(xì)胞器是 。Kp作用的靶細(xì)胞是 。器官A是 。

（2）在幼年期，通過(guò)過(guò)程①反饋調(diào)節(jié)，Kp釋放量 ，最終維持較低的雌激素含量；排卵前期，啟動(dòng)過(guò)程②的生理意義是 ，促進(jìn)排卵。

Ⅱ 某興趣小組通過(guò)記錄傳入神經(jīng)上的電信號(hào)及產(chǎn)生的感覺(jué)，研究了不同刺激與機(jī)體感覺(jué)之間的關(guān)系，結(jié)果如下：

（3）神經(jīng)纖維在未受到刺激時(shí)，膜內(nèi)外電位的表現(xiàn)是 ，受到刺激時(shí)產(chǎn)生的可傳導(dǎo)的興奮稱為 。

（4）不同類型的刺激引起不同類型的感覺(jué)，原因是 不同；不同強(qiáng)度的刺激通過(guò)改變傳入神經(jīng)上電信號(hào)的 ，導(dǎo)致感覺(jué)強(qiáng)度的差異。

（5）當(dāng)給某部位受損的人熱刺激時(shí)，可在整個(gè)傳入通路中記錄到正常電信號(hào)，但未產(chǎn)生感覺(jué)，其受損的部位可能是 。

（6）若在圖中C和D兩點(diǎn)的細(xì)胞膜表面安放電極，中間接記錄儀（電流左進(jìn)右出為＋）。當(dāng)信號(hào)在神經(jīng)細(xì)胞間傳遞時(shí)，檢測(cè)到的結(jié)果是 。

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如圖表示細(xì)胞周期，有關(guān)敘述不正確的是

A.a→b→a表示一個(gè)細(xì)胞周期

B．染色體的平均分配發(fā)生于a→b段

C．b→a段細(xì)胞有適度的生長(zhǎng)

D．根尖分生區(qū)中處于b→a段的細(xì)胞較多

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