Question

19．在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以發(fā)熒光．熒光素酶及其合成基因在生物研究中有著廣泛的應(yīng)用．請回答下列問題：
（1）熒光素酶基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲取．利用PCR技術(shù)擴增熒光素酶基因是利用DNA復(fù)制的原理．
（2）限制酶是切割DNA的工具酶，主要從微生物中分離純化出來．下表為4中限制酶的識別序列個酶切位點，下圖為含有熒光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切點．若需利用酶切法（只用一種酶）獲得熒光酶基因，最應(yīng)選擇的限制酶是Msp1．

限制酶	Msp　I	BamH　I	Mbo　I	Sma　I
酶切位點

Answer 1

分析 分析圖1：含有目的基因的外源DNA分子中含有限制酶BamHⅠ、SmaⅠ、MboⅠ和MspⅠ的識別序列和切割位點，其中BamHⅠ的酶切位點在目的基因的中間，SmaⅠ的酶切位點只有一個，MboⅠ的識別序列中含有MspⅠ的識別序列，因此要獲得目的基因可用限制酶MspⅠ切割．

解答 解：（1）熒光素酶基因可以人工合成、從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增．利用PCR技術(shù)擴增熒光素酶基因是利用DNA復(fù)制的原理．
（2）限制酶具有特異性，是切割DNA的工具酶，主要從微生物中分離純化出來．要獲得目的基因必須在目的基因的兩側(cè)相應(yīng)的酶切位點進行切割，圖1中可以看出，BamHⅠ的酶切位點在目的基因的中間，故不可��；SmaⅠ的酶切位點只有一個，故不可取；根據(jù)表格可以看出，MboⅠ的識別序列中含有MspⅠ的識別序列，因此要獲得目的基因可用限制酶MspⅠ切割．
故答案為：
（1）基因文庫    DNA復(fù)制
（2）微生物    Msp1

點評 本題考查了基因工程的工具和步驟等知識、探究類實驗的設(shè)計，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；具備驗證簡單生物學(xué)事實的能力．