Question

【題目】OKT3為第一個(gè)用于臨床的抗T細(xì)胞的單克隆抗體。該抗體是針對(duì)T細(xì)胞上的CD3（一種抗原）的，可以減小同種異體排斥反應(yīng)，具有中等強(qiáng)度的免疫抑制效應(yīng)，有利于器官移植。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）OKT3的制備過(guò)程中利用的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)有___________________。

（2）制備OKT3時(shí)，首先要將__________注入小鼠體內(nèi)，從小鼠的_________中獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，需要將該種細(xì)胞與_____________融合并經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)基篩選，獲得的細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和_________，才能得到專一產(chǎn)生OKT3的雜交瘤細(xì)胞。

（3）研究人員發(fā)現(xiàn)，注入小鼠體內(nèi)的OKT3能作用于T細(xì)胞，T細(xì)胞的功能受到影響時(shí)會(huì)導(dǎo)致小鼠體內(nèi)的抗體合成量明顯下降，請(qǐng)解釋其原因是___________________________。

Answer 1

【答案】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù) OKT3抗原 脾臟 骨髓瘤細(xì)胞 抗體檢測(cè) 當(dāng)T細(xì)胞受損時(shí)，T細(xì)胞無(wú)法正常分泌淋巴因子，淋巴因子分泌量減少，會(huì)導(dǎo)致B細(xì)胞不能正常分化形成漿細(xì)胞，最終導(dǎo)致抗體的生產(chǎn)量減少

【解析】

單克隆抗體的制備
（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞
（2）獲得雜交瘤細(xì)胞
①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；
②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。
（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；
（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；
（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

（1）OKT3單克隆抗體的制備過(guò)程中依據(jù)了動(dòng)物細(xì)胞增殖和細(xì)胞膜的流動(dòng)性的原理，應(yīng)用的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。
（2）制備OKT3時(shí)，首先要將OKT3抗原注入小鼠體內(nèi)；以獲得相應(yīng)的經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞即漿細(xì)胞，漿細(xì)胞可以從小鼠的免疫器官脾臟中獲得；需要將該細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合、雜交后要經(jīng)過(guò)兩次篩選，最終獲得既能產(chǎn)生針對(duì)CD3的抗體，又能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞。獲得的細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專一抗體陽(yáng)性檢測(cè)，才能得到專一產(chǎn)生OKT3的雜交瘤細(xì)胞。

（3）B淋巴細(xì)胞的增殖分化需要淋巴因子的刺激，據(jù)題干信息可知，OKT3能作用于T細(xì)胞，當(dāng)T細(xì)胞受損時(shí)，T細(xì)胞無(wú)法正常分泌淋巴因子，淋巴因子分泌量減少，會(huì)導(dǎo)致B細(xì)胞不能正常分化形成漿細(xì)胞，最終導(dǎo)致抗體的生產(chǎn)量減少。