Question

【題目】請回答下列有關基因工程的問題。下表是基因工程中幾種限制酶識別序列及其切割位點。圖是轉基因香蕉的培育過程，含目的基因的外源DNA和質粒上的箭頭表示相關限制酶的酶切位點。

（1）從轉基因香蕉培育圖中反映了質粒作為運載體的特點是_______________答出其中兩點即可），基因工程中還可以用_____________作為運載體。

（2）圖中的質粒和目的基因構建重組質粒，不能使用SmaI酶切割，原因是_____________。

（3）下圖是用___________ (限制）酶進行切割得到的目的基因�？梢苑乐购�目的基因的外源DNA片段切割后自身環(huán)化。

（4）人體細胞內含有抑制癌癥發(fā)生的某基因，生物技術可對此類基因的變化進行檢測。該基因含有800對堿基對(bp)，用BamHⅠ切割得到的400bp，200bp，200bp,．用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，50bp,200bp．而患者體內獲取的這段基因，用BamHⅠ切割得到的區(qū)段變?yōu)?00bp，400bp ，用EcoRⅠ再次切割得到100bp,300bp,150bp，250bp．在正常人體內BamHⅠ和EcoRⅠ識別序列分別有 _______個和_______個，患者體內發(fā)生了 ________________。

Answer 1

【答案】有多個酶切位點、有標記基因、能在宿主細胞內復制并穩(wěn)定保存 λ噬菌體衍生物、動植物病毒 SmaI酶會破壞目的基因和質粒上的標記基因 BamHⅠ和HindⅢ 2個 2個 基因突變

【解析】

1、限制酶是指能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

2、運載體需要具有以下特點：能在受體細胞中復制并穩(wěn)定存在；具有一個或多個限制酶切割位點，供外源DNA片段插入；具有標記基因等�；�因工程中常用的運載體是質粒，除此之外，λ噬菌體衍生物和動植物病毒也可作為運載體。

（1）質粒作為常用的基因工程的運輸工具，應具備的基本條件有：具有標記基因、具有一個或多個限制酶切點、能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存�；�因工程中還可以用λ噬菌體衍生物、動植物病毒作為運載體。

（2）由于目的基因和質粒上的標記基因中含有SmaI酶的酶切位點，若使用SmaI酶會破壞目的基因和質粒上的標記基因，所以圖中的質粒和目的基因構建重組質粒時，不能使用SmaI酶切割。

（3）結合表格中不同限制酶識別的序列以及目的基因被切割后兩端黏性末端的堿基組成可知，該目的基因左端是用BamHⅠ酶切割、右端是用HindⅢ酶切割得到的，這種使用不同酶切割后的目的基因的兩端黏性末端不同，可防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身環(huán)化。

（4）該基因含有800對堿基對(bp)，用BamHⅠ酶切割得到的400bp，200bp，200bp,說明該基因中含有兩個BamHⅠ酶的酶切位點。用EcoRⅠ酶再次切割得到100bp,300bp,150bp，50bp,200bp，說明切割后的片段中含有EcoRⅠ酶的兩個酶切位點；而患者體內獲取的這段基因，用BamHⅠ切割得到的區(qū)段變?yōu)?00bp，400bp，用EcoRⅠ酶再次切割得到100bp,300bp,150bp，250bp，說明其中一個BamHⅠ酶的酶切位點發(fā)生了變化，未被BamHⅠ酶識別并切割，而EcoRⅠ酶的酶切位點是正常的，所以可說明患者體內發(fā)生了基因突變。