Question

6．（9分）某研究小組進(jìn)行藥物試驗時，以動物肝細(xì)胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：

（1）將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同。一段時間后，觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量__________。

（2）在動物細(xì)胞培養(yǎng)時，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是___________。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO₂的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO₂的作用是____________________________。

（3）在兩種細(xì)胞生長過程中，當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時，其生長____________。若用動物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液，需用___________消化處理。

（4）為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的_______________。

（5）已知癌基因X過量表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，要試驗一種抗腫瘤藥物Y對甲細(xì)胞生長的影響，可將甲細(xì)胞分為A、B兩組，A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入_______________，B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入等量無菌生理鹽水，經(jīng)培養(yǎng)后，從A、B兩組收集等量細(xì)胞，通過分別檢測X基因在A、B兩組細(xì)胞中的_______________或_______________合成水平的差異，確定Y的藥效。

Answer 1

【答案】

6. （1）多

（2）制造出與血液類似的環(huán)境。提供營養(yǎng)  

  調(diào)節(jié)pH值

（3）趨于停止 （接觸抑制）    多       膠原蛋白酶 （胰蛋白酶）

（4）抗生素

（5）Y   mRNA  蛋白質(zhì)

【解析】(1) 甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞為無限增殖的細(xì)胞，細(xì)胞周期短。在相同條件下，培養(yǎng)相同的時間，甲細(xì)胞的數(shù)量多于乙細(xì)胞。 (2) 動物細(xì)胞培養(yǎng)液中必須加入動物血清，血清中含有血清蛋白、生長因子、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的因子、激素等合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)。大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)液所需 pH 為 7.2 ～ 7.4 ，而多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉 (NaHCO3) 與 CO2 體系進(jìn)行緩沖，所以 CO2 的作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)液 pH 。  (3) 甲為腫瘤細(xì)胞能無限增殖，傳代的次數(shù)要比乙細(xì)胞多，乙細(xì)胞 ( 正常肝細(xì)胞 ) 在培養(yǎng)瓶中貼壁生長，當(dāng)鋪滿瓶壁時，生長停止。為得到更多的肝細(xì)胞，需要定期地用胰蛋白酶使細(xì)胞脫離瓶壁，進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 (4) 培養(yǎng)液中加入抗生素來抑制和殺滅微生物，抗生素對動物細(xì)胞沒有影響。 (5) 設(shè)計一組加入抗癌藥物的實驗組，一組不加藥物的對照組，通過檢測藥物影響 X 基因的表達(dá)過程，即轉(zhuǎn)錄形成 mRNA 、翻譯形成蛋白質(zhì)的量來檢驗藥效。