Question

血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分，負(fù)責(zé)血液中O₂和部分CO₂的運(yùn)輸．請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖（如圖1））回答問(wèn)題．

（1）將實(shí)驗(yàn)流程圖補(bǔ)充完整：A為

 

，B為

 

．
（2）血紅蛋白的提取方法可以采用

 

，洗滌紅細(xì)胞的目的是去除

 

，洗滌干凈的標(biāo)志是

 

．
（3）已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子，其分子大小、所帶電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如圖2所示．．
①將樣品裝入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋內(nèi)，則分子

 

也保留在袋內(nèi)．
②若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì)，則分子

 

移動(dòng)速度最快．
③若將樣品以2000r/min的速度離心10min，分子戊存在于沉淀中，則分子

 

可能不存在于沉淀中．

Answer 1

考點(diǎn)：蛋白質(zhì)的提取和分離

專(zhuān)題：

分析：1、血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定．樣品處理包括四個(gè)步驟，即紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液和透析．樣品純化的目的是通過(guò)凝膠色譜法將相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)除去．
2、透析袋是利用半透膜制作的，半透膜可以讓小分子可以自由進(jìn)出，而大分子不能通過(guò)．
3、凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng)的速度慢，相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動(dòng)的速度快．

解答： 解：（1）樣品處理包括四個(gè)步驟，即紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液和透析．故A為血紅蛋白的釋放，B為裝填完凝膠色譜柱的操作，故B為樣品的加入和洗脫．
（2）血紅蛋白的提取方法可以采用凝膠色譜法，洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，洗滌干凈的標(biāo)志是上清液不再呈現(xiàn)黃色．
（3）據(jù)圖2可知，分子量大小為丙＞�。疽遥疚欤炯祝�
①血紅蛋白溶液的粗分離采用的方法是透析，即將集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進(jìn)行透析，去掉分子量較小的雜質(zhì)，原理是小分子雜質(zhì)可以通過(guò)透析袋進(jìn)入緩沖液中，血紅蛋白分子量較大，不能通過(guò)透析袋進(jìn)入緩沖溶液．將樣品裝入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋內(nèi)，則分子丙和丁也保留在袋內(nèi)，因其分子量大于乙．
②若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì)，分子量大的分子經(jīng)過(guò)的路程短，故分子量大的蛋白質(zhì)分子先洗脫出來(lái)，則分子丙移動(dòng)速度最快．
③若將樣品以2000r/min的速度離心10min，分子量大的分子進(jìn)入沉淀中，故若分子戊存在于沉淀中，則分子乙、丙、丁均存在于沉淀中，分子較小的甲可能不存在于沉淀中．
故答案為：
（1）血紅蛋白的釋放     樣品的加入和洗脫
（2）凝膠色譜法       雜蛋白    上清液不再呈現(xiàn)黃色
（3）①丙和丁    ②丙     ③甲

點(diǎn)評(píng)：本題考查學(xué)生對(duì)蛋白質(zhì)的提取和分離實(shí)驗(yàn)操作步驟的識(shí)記和理解．難度一般，對(duì)血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理和具體操作方法的掌握是解答本題的關(guān)鍵．