Question

16．請回答下列生物技術方面的問題．
（1）微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者是將菌液進行一系列的稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，再進行培養(yǎng)．菌落是在固體培養(yǎng)基上由單個細胞繁殖而來的形態(tài)可見的子細胞群體．
（2）菊花的組織培養(yǎng)的大致過程如圖1所示，請回答下列問題：

圖中B、C依次表示脫分化、再分化過程（填名稱），添加的兩種關鍵激素是生長素、細胞分裂素；．該實驗操作成功的關鍵是無菌操作（或無菌技術），所以要對外植體、超凈工作臺等進行消毒，對培養(yǎng)基或培養(yǎng)器具等進行殺菌．
（3）同學乙利用凝膠色譜法進行血紅蛋白的分離（如圖2），他在操作中加樣的正確順序是④②①③．

Answer 1

分析 1、微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，前者是指通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種，逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，后者是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)．
2、植物組織培養(yǎng)是指離體的組織或器官在人工控制的培養(yǎng)基及環(huán)境條件下增殖分化成完整植株的一種無菌培養(yǎng)技術；基本過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發(fā)育植株（新植體）．組織培養(yǎng)需用MS培養(yǎng)基，其成分包括大量元素、微量元素及植物激素和有機物．
3、血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有：
（1）樣品處理：①紅細胞的洗滌（低速短時間離心），②血紅蛋白的釋放（需要加入蒸餾水和甲苯），③分離血紅蛋白（中速長時間離心）．
（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析．
（3）純化：調節(jié)緩沖液面→加入蛋白質樣品→調節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質．
（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳．

解答 解：（1）微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者是將菌液進行一系列的稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，再進行培養(yǎng)，菌落是在固體培養(yǎng)基上由單個細胞繁殖而來的形態(tài)可見的子細胞群體．
（2）圖中B、C依次表示脫分化、再分化過程，添加的關鍵激素是細胞分裂素、生長素．該實驗操作成功的關鍵是無菌操作，所以要對外植體、超凈工作臺等消毒，對培養(yǎng)基或培養(yǎng)器具等進行滅菌．
（3）④正確的加樣順序可依據(jù)樣品在色譜柱及凝膠層中的滲入量進行分析，可以得出是④①②③．
故答案為：
（1）稀釋涂布平板法    稀釋    培養(yǎng)    單個細胞
（2）脫分化、再分化   生長素、細胞分裂素    無菌操作（或無菌技術）     消毒    殺菌
（3）④②①③

點評 本題考查微生物的分離與培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)、血紅蛋白的分離等相關知識，要求學生理解實驗目的、原理、方法和操作步驟，掌握相關的操作技能，能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用；并對實驗現(xiàn)象和結果進行解釋、分析、處理．