Question

44.（10分）探針是指以放射性同位素、生物素或熒光染料等進(jìn)行標(biāo)記的已知核苷酸序列的核酸片段，可用于核酸分子雜交以檢測(cè)目標(biāo)核苷酸序列是否存在。下圖一是某實(shí)驗(yàn)小組制備的兩種探針，圖二是探針與目的基因雜交的示意圖。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：

（1）核酸探針與目標(biāo)核苷酸序列間的分子雜交遵循__________。設(shè)計(jì)核苷酸序列是核酸探針技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。圖一所示的兩種核酸探針（探針2只標(biāo)注了部分堿基序列）都不合理，請(qǐng)分別說(shuō)明理由__________、__________。

（2）cDNA探針是目前應(yīng)用最為廣泛的一種探針。制備cDNA探針時(shí)，首先需提取、分離獲得__________作為模板，在__________的催化下合成cDNA探針。利用制備好的-珠蛋白基因的cDNA探針與-珠蛋白基因雜交后，出現(xiàn)了如圖二中甲、乙、丙、丁等所示的“發(fā)夾結(jié)構(gòu)”，原因是____________________。

（3）基因工程中利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)-抗胰蛋白酶，應(yīng)選用__________切割含有目的基因的DNA片段和載體，并用__________方法導(dǎo)入__________中，再利用SRY探針（Y染色體上的性別決定基因）進(jìn)行檢測(cè)，將檢測(cè)反應(yīng)呈__________（選填“陽(yáng)”、“陰”）性的胚胎進(jìn)行移植培養(yǎng)。

Answer 1

44. 堿基互補(bǔ)配對(duì)原則  探針1堿基序列過(guò)短，特異性差  探針2自身折疊后會(huì)出現(xiàn)部分堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效

（2）mRNA  逆轉(zhuǎn)錄酶        -珠蛋白基因中含有不表達(dá)序列（或內(nèi)含子）

（3）同種限制酶    顯微注射    受精卵    陰性