Question

15．定點(diǎn)突變技術(shù)是指利用PCR等技術(shù)向目的DNA片段中引入所需變化，包括堿基的添加、刪除、點(diǎn)突變等方法．如圖示利用定點(diǎn)突變技術(shù)獲得突變質(zhì)粒的過(guò)程，請(qǐng)結(jié)合圖示回答問(wèn)題：
（1）基因工程中使用的載體除質(zhì)粒外，還可以用λ噬菌體（的衍生物）和動(dòng)植物病毒．
（2）在定點(diǎn)突變的過(guò)程中，需用含有突變位點(diǎn)的人工DNA片段作為引物．PCR過(guò)程中還需要原料、模板、耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）等條件．
（3）甲基化酶Dpn I可以選擇性降解質(zhì)粒模板，說(shuō)明該酶具有專一性或特異性．
（4）定點(diǎn)突變技術(shù)可以用于以下的①②③④．
①研究某些氨基酸殘基對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的影響
②獲得符合人們需要的蛋白藥物、基因工程酶
③修飾基因表達(dá)載體
④給基因表達(dá)載體引入新的酶切位點(diǎn)
（5）若要將含有突變位點(diǎn)的質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中，首先需要用Ca²⁺處理大腸桿菌細(xì)胞使其處于感受態(tài)，然后將質(zhì)粒溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定溫度下促使其轉(zhuǎn)化．

Answer 1

分析 據(jù)圖分析，定點(diǎn)突變技術(shù)中，人工DNA片段作為引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，活動(dòng)大量突變質(zhì)粒．

解答 解：（1）基因工程中常使用的載體有質(zhì)粒、λ噬菌體（的衍生物）和動(dòng)植物病毒．
（2）在定點(diǎn)突變的過(guò)程中，需用含有突變位點(diǎn)的人工DNA片段作為引物，引導(dǎo)子鏈合成．PCR過(guò)程中還需要原料（脫氧核苷酸）、模板（DNA鏈）、耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）等條件．
（3）甲基化酶Dpn I可以選擇性降解質(zhì)粒模板，說(shuō)明該酶具有專一性或特異性性．
（4）①定點(diǎn)突變技術(shù)可以用于研究某些氨基酸殘基對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的影響，①正確；
②定點(diǎn)突變技術(shù)可以用于獲得符合人們需要的蛋白藥物、基因工程酶，②正確；
③定點(diǎn)突變技術(shù)可以用于修飾基因表達(dá)載體，③正確；
④定點(diǎn)突變技術(shù)可以用于給基因表達(dá)載體引入新的酶切位點(diǎn)，④正確．
（5）若要將含有突變位點(diǎn)的質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中，首先需要用Ca²⁺處理大腸桿菌細(xì)胞使其處于感受態(tài)，然后將質(zhì)粒溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定溫度下促使其轉(zhuǎn)化．
故答案為：
（1）λ噬菌體（的衍生物）  動(dòng)植物病毒
（2）引物  原料  耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）
（3）專一性或特異性
（4）①②③④
（5）Ca²⁺   緩沖液

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的工具和步驟、PCR技術(shù)、酶的特性，意在考查學(xué)生的識(shí)圖和理解能力，難度不大．