Question

16．基因工程制藥是制藥行業(yè)的一支新軍，不僅具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，發(fā)展速度也很快，如圖是應(yīng)用基因工程構(gòu)建皰疹病毒亞單位疫苗的方法，請(qǐng)根據(jù)圖示回答下列問(wèn)題：

（1）提取單純皰疹病毒DNA后用限制酶切取外殼蛋白基因作為目的基因，獲取目的基因后，要用PCR技術(shù)對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增．
（2）首先，要已知目的基因的一段核苷酸序列，以便人工合成引物．將過(guò)量的引物與目的基因混合，加熱到90-95℃，使雙鏈DNA解旋成單鏈，之后冷卻到55-60℃，引物與DNA單鏈結(jié)合，下一步，加入Taq酶和4種脫氧核苷酸，升高溫度至70-75℃后，完成互補(bǔ)鏈的合成，如此重復(fù)循環(huán)多次，直到產(chǎn)生足夠供實(shí)驗(yàn)用的目的基因．
（3）提取并剪切牛痘DNA，使其與目的基因連接成重組DNA后，在活細(xì)胞中培養(yǎng)一段時(shí)間后，分離出無(wú)害的病毒（疫苗），它含有與單純皰疹病毒相同的外殼．
（4）將分離出的疫苗注射到人體內(nèi)，激活人體的體液免疫，產(chǎn)生抗體和記憶細(xì)胞．

Answer 1

分析 PCR技術(shù)：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
2、原理：DNA復(fù)制．
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物．
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
5、過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．

解答 解：（1）從皰疹病毒DNA上獲取外殼蛋白基因作為目的基因時(shí)，需要用限制酶；PCR技術(shù)可在體外擴(kuò)增目的基因．
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，需要已知目的基因的一段核苷酸序列，以便人工合成引物．將過(guò)量的引物與目的基因混合，加熱到90-95℃，使雙鏈DNA解旋成單鏈，之后冷卻到55-60℃，引物與DNA單鏈結(jié)合，下一步，加入Taq酶和4種脫氧核苷酸，升高溫度至70-75℃后，完成互補(bǔ)鏈的合成，如此重復(fù)循環(huán)多次，直到產(chǎn)生足夠供實(shí)驗(yàn)用的目的基因．
（3）提取并剪切牛痘DNA，使其與目的基因連接成重組DNA后，需要導(dǎo)入受體細(xì)胞（活細(xì)胞）中培養(yǎng)一段時(shí)間后，分離出無(wú)害的病毒（疫苗），它含有與單純皰疹病毒相同的外殼．
（4）抗體是體液免疫產(chǎn)生的．
故答案為：
（1）限制      外殼蛋白     PCR技術(shù)
（2）一段核苷酸序列     90-95     Taq酶
（3）活細(xì)胞     單純皰疹病毒
（4）體液

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，了解基因工程技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．