（1）有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株．回答問題：
①培養(yǎng)基的滅菌是將培養(yǎng)基放在溫度為
壓力為
的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)
分鐘．
②在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以
為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上．
③純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的兩種接種方法是
．
④為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍透明區(qū)的大小，透明區(qū)大說明該菌株的降解能力
．
（2）常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進(jìn)行酒精發(fā)酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精，但是對(duì)酒精的耐受能力差．科學(xué)家利用基因工程培育了能利用這兩種糖進(jìn)行發(fā)酵且對(duì)酒精耐受能力強(qiáng)的釀酒酵母．將自然界中采集到的葡萄帶回實(shí)驗(yàn)室，用無菌水將葡萄皮上的微生物沖洗到無菌的三角瓶中，然后將瓶中的液體接種于固體培養(yǎng)基上，在適宜的條件下培養(yǎng)，獲得各種菌落．
①將培養(yǎng)基上的酵母菌菌株轉(zhuǎn)接到
的培養(yǎng)基中，無氧條件下培養(yǎng)一周后，有些酵母菌死亡，說明這些酵母菌不能利用木糖發(fā)酵．從存活的酵母菌中提取DNA，經(jīng)大量擴(kuò)增獲得目的基因．
②將目的基因連接到質(zhì)粒上，該質(zhì)粒具有尿嘧啶合成酶基因作為標(biāo)記基因．將重組質(zhì)粒導(dǎo)入酵母菌時(shí)，應(yīng)選擇缺乏
能力的釀酒酵母作為受體菌．
③將上述獲得的轉(zhuǎn)基因釀酒酵母接種在以
為碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵能力測(cè)試．隨著發(fā)酵的持續(xù)進(jìn)行，若該釀酒酵母能夠存活，說明它能
，即說明所需菌株培育成功．
