Question

根據學過的知識回答下列問題：

(1)商品化植酸酶主要來自微生物。在產酶菌株篩選過程中，常在基本培養(yǎng)基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產生__________，可根據其大小選擇目的菌株，所得菌株需要進一步測定植酸酶活性。活性測定可用植酸鈉作為底物，活性可用一定條件下單位時間______________表示。

(2)利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如下圖：

發(fā)酵液―→―→含酶的發(fā)酵液―→―→―→―→純酶

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菌體去除　透析液(Ⅰ)去除

Ⅰ中的主要成分為____________；Ⅱ中包含多種酸酶等多種蛋白質。請寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據。

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

(3)為建設基因工程菌，可用PCR等技術從上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反應包含多次循環(huán)，每次循環(huán)包括三步：________________。反應過程中打開模板DNA雙鏈的方法是________。

(4)除植酸酶外，微生物還應用在________________________的生產中。

 

Answer 1

(1)透明圈　植酸鈉的消耗量(肌醇和磷酸的生成量)　(2)小分子雜質

凝膠色譜法，根據蛋白質之間分子大小、吸附性質等差異進行純化。

電泳法，根據蛋白質之間電荷、分子大小等差異進行純化。

(3)變性，復性，延伸　加熱

(4)蛋白酶，脂肪酶，纖維素酶

本題考查對微生物的分離和培養(yǎng)，蛋白質的純化，酶活性鑒定等知識，結合實際應用。