Question

16．我國科學(xué)工作者利用基因和胚胎工程生產(chǎn)人紅細(xì)胞生成素（htPA），據(jù)圖回答：

（1）在短時(shí)間內(nèi)獲得較多的htPA基因，通常采用PCR技術(shù)．構(gòu)建重組表達(dá)載體的構(gòu)建用到的工具酶有限制酶（或限制性核酸內(nèi)切酶）和DNA連接酶，重組表達(dá)載體中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．
（2）檢測(cè)htPA基因是否已插入受體細(xì)胞的染色體DNA，可采用DNA分子雜交技術(shù)．
（3）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵； 同時(shí)對(duì)受體母羊做同期發(fā)情處理．
（4）為了獲得多個(gè)相同的轉(zhuǎn)基因母羊，常采用胚胎分割方法，該方法操作的最佳時(shí)期是胚胎發(fā)育的桑葚胚或囊胚期．

Answer 1

分析 1、DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體．
2、目的基因分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．
3、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查．

解答 解：（1）PCR技術(shù)可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因；構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要用同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）切割外源DNA分子和運(yùn)載體，以形成相同的黏性末端，然后再通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體；重組表達(dá)載體中的啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．
（2）檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞采用DNA分子雜交技術(shù)．
（3）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵．同時(shí)對(duì)受體母羊做同期發(fā)情處理，保證供受體具有相同的生理環(huán)境．
（4）來自同一個(gè)胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此為了獲得更多的轉(zhuǎn)htPA基因母羊，移植前首先對(duì)含有htPA基因的胚胎進(jìn)行胚胎分割和培養(yǎng)，然后再通過胚胎移植技術(shù)可獲得較多后代．
故答案為：
（1）PCR     限制酶（或限制性核酸內(nèi)切酶）    DNA連接酶   啟動(dòng)子
（2）DNA分子雜交
（3）超數(shù)排卵      同期發(fā)情
（4）胚胎分割

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記基因工程的操作步驟，明確該基因工程中需要選擇母羊進(jìn)行胚胎移植；識(shí)記胚胎工程的相關(guān)技術(shù)及應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的考查．