Question

35．（8分）【生物—現(xiàn)在生物科技專題】

已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下：

(1)實(shí)驗(yàn)步驟①所代表的反應(yīng)過程是___________________________________________。

(2)步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B必須使用________________________________________________________________________。

(3)如果省略步驟②而將大量擴(kuò)增的S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達(dá)的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能________，也不能______________。

(4)為了檢驗(yàn)步驟④所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特征，可用________與________進(jìn)行抗原—抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，從而得出結(jié)論。

(5)步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是____________________________________。

Answer 1

35．(1)逆轉(zhuǎn)錄

(2)限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶

(3)復(fù)制　合成S基因的mRNA(或轉(zhuǎn)錄)

(4)大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白　SARS康復(fù)病人血清

(5)相同　表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同

解析：本題考查基因工程的工具及操作步驟和學(xué)生識圖能力。(1)圖中①RNA→DNA表示通過逆轉(zhuǎn)錄方式獲得目的基因。(2)基因表達(dá)載體構(gòu)建時，需要利用限制酶對載體和目的基因進(jìn)行剪切，形成黏性末端，然后用DNA連接酶將目的基因和載體連接起來，形成重組載體。(3)目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后，需要借助于載體在受體細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制而擴(kuò)增目的基因，從而獲得大量的表達(dá)產(chǎn)物，而直接導(dǎo)入則容易被受體細(xì)胞中的DNA水解酶所水解，導(dǎo)致得不到表達(dá)產(chǎn)物。(4)S蛋白為SARS病毒表面主要的病毒抗原，因此用抗原—抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)可檢測其是否具有同樣的抗原性。(5)步驟④和⑥相比，基因相同，只是導(dǎo)入的受體細(xì)胞的種類不同，因?yàn)檎婧松�物和原核生物共用一套密碼子，所以表達(dá)產(chǎn)物相同。