Question

【題目】 PCR技術有效地解決了因為樣品中DNA含量太低而難以對樣品進行研究的問題，而被廣泛應用，此過程需要一種Taq DNA聚合酶。請回答有關問題：

（1）體內(nèi)DNA復制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA，而PCR技術中應用__________。

（2）Taq DNA聚合酶是從水生耐熱細菌Taq中分離的。

①Taq DNA聚合酶的功能是________________________________________。

②Taq DNA聚合酶的化學本質(zhì)為蛋白質(zhì)，可用________法和__________法進行分離。

（3）相對于細菌分離，DNA分子的分離和提取操作要復雜的多。

①在DNA提取中兩次用到蒸餾水，其目的分別是____________、_____________。

②實驗中能否以哺乳動物成熟的紅細胞為實驗材料？為什么？__________________。

（4）與體內(nèi)DNA復制相比較，PCR反應要在________________中才能進行，并且要嚴格控制________條件。

（5）PCR中加入的引物有____________種，加入引物的作用是______________________。

Answer 1

【答案】

（1）高溫使DNA分子熱變性

（2）①催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵 ②凝膠色譜 電泳

（3）①使血細胞破裂，釋放出DNA分子 稀釋NaCl溶液，使DNA分子析出 ②不能，哺乳動物成熟的紅細胞中無DNA 分子

（4）一定的緩沖溶液 溫度

（5）2 作為DNA復制的起點

【解析】

試題分析：

（1）PCR技術中用高溫使DNA分子中的氫鍵打開,從而解旋。

（2）①在DNA分子復制中,TaqDNA聚合酶將兩個脫氧核苷酸的脫氧核糖和另一脫氧核苷酸的磷酸連結(jié)形成磷酸二酯鍵。

②蛋白質(zhì)的分離可以根據(jù)其分子大小和帶電的性質(zhì)和多少使之分離,即凝膠色譜法和電泳法。

（3）①在使用蒸餾水時,第一次使血細胞破裂,第二次使NaCl溶液濃度降低至0.14 mol/L。

（4）PCR反應是在一定的緩沖溶液中進行的,并需嚴格控制好溫度條件。

（5）PCR中與體內(nèi)DNA復制過程中的原料是完全相同的,并加入小段單鏈DNA或RNA作為引物,引導DNA復制,可以使游離的脫氧核苷酸與之結(jié)合形成磷酸二酯鍵,成為DNA復制的起點。