Question

科學(xué)家從某些能無(wú)限增殖的細(xì)胞質(zhì)中分離出無(wú)限增殖的調(diào)控基因（prC），該基因能激發(fā)許多動(dòng)物細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景．請(qǐng)回答以下問(wèn)題．
（1）利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素是

 

．
（2）利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)有兩次篩選，第1次篩選的目的是

 

，第2次篩選的目的是

 

．
（3）有人提出，可以直接通過(guò)基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來(lái)制備單克隆抗體，其思路如圖1示．請(qǐng)回答：
①酶A是指

 

，酶B是指

 

．
②對(duì)已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的Ⅱ進(jìn)行“檢測(cè)”的目的是

 

；題目中Ⅱ所指的細(xì)胞是

 

，Ⅲ所指的細(xì)胞具有的特點(diǎn)是

 

．
③若將目的基因轉(zhuǎn)入胚胎干細(xì)胞中，胚胎干細(xì)胞也能夠發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，所依據(jù)的生物學(xué)原理是

 

．胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下可以增殖而不發(fā)生

 

，但通過(guò)體外定向誘導(dǎo)，能培育出人造

 

．
（4）也有人提出用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體，試用相關(guān)的圖2及文字表示該過(guò)程：

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：單克隆抗體的制備過(guò)程,基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：制備單克隆抗體的過(guò)程中，誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法物理法、化學(xué)法或滅活的病毒；在基因工程中，需要使用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，然后在DNA連接酶的作用下形成重組質(zhì)粒，第三步是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，最后是目的基因的檢測(cè)與鑒定，是為了選擇出目的基因成功表達(dá)的細(xì)胞；在動(dòng)物細(xì)胞核移植時(shí)，要根據(jù)題意選擇細(xì)胞核和去核的細(xì)胞質(zhì)．

解答： 解：（1）利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒．
（2）利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體時(shí)有兩次篩選，第1次篩選的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，第2次篩選的目的是篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞．
（3）①在基因工程中，獲取目的基因和質(zhì)粒需要使用限制酶，然后在DNA連接酶的作用下形成重組質(zhì)粒．
②基因工程中，將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后，還需要目的基因的檢測(cè)和鑒定，其目的是檢測(cè)目的基因是否在受體細(xì)胞中成功表達(dá)．題目中Ⅱ所指的細(xì)胞是漿細(xì)胞，Ⅲ細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特定抗體．
③若將目的基因轉(zhuǎn)入胚胎干細(xì)胞中，胚胎干細(xì)胞也能夠發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，所依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞的全能性．胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下可以增殖而不發(fā)生分化，但通過(guò)體外定向誘導(dǎo)，能培育出人造器官和組織．
（4）由于調(diào)控細(xì)胞無(wú)限增殖的prG基因位于細(xì)胞質(zhì)中，因此若要采用細(xì)胞核移植獲得單克隆抗體時(shí)，只能講漿細(xì)胞的細(xì)胞核移入到含有prG基因的細(xì)胞質(zhì)中，獲得重組細(xì)胞，最終獲得單克隆抗體．
故答案為：
（1）滅活的病毒 
（2）篩選出雜交瘤細(xì)胞    　篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞
（3）①限制性（核酸）內(nèi)切酶   　DNA連接酶
②檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞中是否進(jìn)行了表達(dá)（或檢測(cè)受體細(xì)胞是否顯示出目的基因控制的性狀）   　漿細(xì)胞　
既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特定抗體
③細(xì)胞的全能性   　分化   　器官和組織
（4）如圖

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程、動(dòng)物細(xì)胞核移植和單克隆抗體的制備過(guò)程，比較綜合，但不是特別難；答題時(shí)要注意題干中的信息，如利用細(xì)胞核移植獲得單克隆抗體時(shí)，只能將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的含有prG基因的細(xì)胞質(zhì)中，因?yàn)楦鶕?jù)題干可知，prG基因只存在于能無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中．