Question

3．完成如圖基因工程操作的常規(guī)方法概念圖：

限制酶、DNA連接酶、目的基因的檢測．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：基因工程中，首先需要用限制酶提取目的基因；獲得目的基因后，利用限制酶和DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合；構(gòu)建基因表達(dá)載體后，將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；基因工程操作是否成功需要最后一步，即目的基因的檢測與鑒定．
故答案為：限制酶    DNA連接酶    目的基因的檢測

點(diǎn)評 本題著重考查了基因工程的操作步驟，屬于簡單題，考生要能夠根據(jù)基因工程的操作過程識記四個步驟，屬于考綱中識記層次的考查．