Question

40．（15分）根據(jù)基因工程的有關知識，回答下列問題：

（１）限制性內(nèi)切酶切割ＤＮＡ分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型有　  　　和　  　　。

（２）質(zhì)粒運載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下：

為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點是　                            　　。

（３）按其來源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即　　　　　DNA連接酶和　　　　　　　DNA連接酶。

（４）反轉錄作用的模板是　     　　，產(chǎn)物是　　    　。若要在體外獲得大量反轉錄產(chǎn)物，常采用　　      　技術。

（５）基因工程中除質(zhì)粒外，　　　　　和　　　　　　也可作為運載體。

（６）若用重組質(zhì)粒轉化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是　　　　                                              　　　。

Answer 1

【答案】（１）平末端和粘性末端   （２）切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的相同   （３）Ｔ_４　�。與oli    （４）mRNA  單鏈ＤＮＡ　　�。校茫遥ň酆厦告準椒磻�）   （５）動植物病毒　　λ噬菌體的衍生物   （６）未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱

【解析】本題著重考查基因工程方面的知識。限制性核酸內(nèi)切酶可以將DNA分子切成兩種類型的末端，平末端和黏性末端。兩種不同酶切割之后便于相連，所產(chǎn)生的黏性末端必須相同。ＥcoliDNA連接酶可以連接黏性末端，Ｔ_４DNA連接酶可以連接兩種末端，反轉錄是以mRNA為模板逆轉錄先合成單鏈DNA，再合成雙鏈DNA，利用ＰＣＲ技術進行大量擴增�；�因工程中可以選用質(zhì)粒，噬菌體、動植物病毒做載體。當受體細胞是細菌時，為了增大導入的成功率，常用Ca+處理，得到感受態(tài)細胞，此時細胞壁和細胞膜的通透性增大，容易吸收重組質(zhì)粒。